Как сдавать анализ кала на хеликобактер пилори. Методы диагностики хеликобактер пилори: анализ крови на антитела, анализ кала методом пцр, уреазные тесты (при фгдс, дыхательный), биопсия с цитологией Сколько делается анализ кала на хеликобактер

Не все пациенты знают, как сдавать анализ кала, а ведь от этого зависит качество его расшифровки.

Кислая среда является наиболее приемлемой для жизни Хеликобактер пилори, поэтому основное место, где приживается эта болезнь – желудок.

В нем организм быстро размножается, а также легко передвигается. В неблагоприятной среде, в отличие от многих других организмов, Хеликобактер пилори не погибает, а лишь меняет форму, в которой он способен существовать, пока условия не станут более удобными для жизни.

Наиболее простой способ обнаружения Хеликобактер пилори – анализ кала. С его помощью можно точно установить наличие этой бактерии в организме.

Если Хеликобактер пилори чаще встречается у взрослых, то такое явление, как энтеробиоз, чаще можно обнаружить у ребенка.

Из-за них у зараженного острицами человека заметно снижается иммунитет, что может впоследствии привести к более серьезным заболеваниям.

Энтеробиоз легко передается от человека к человеку, особенно при недостаточном соблюдении личной гигиены, именно поэтому он чаще встречается у детей.

С помощью анализа кала можно выявить в организме яйца гельминтов – их откладывают самки остриц, чаще всего ночью.

Например, при обнаружении крови, слизи, нехарактерном цвете фекалий и ряде других отклонений обычно назначаются дополнительные анализы, чтобы точно установить степень поражения органа, а также другие особенности болезни.

Как сдавать анализ?

В том, как правильно сдавать анализ кала, нет ничего сложного. Материал на анализ всегда нужно собирать только в чистую посуду, сделанную из стекла или пластика.

Процесс дефекации должен быть естественным, без клизм или слабительных препаратов, поскольку иначе результаты анализа получатся недостоверными.

Идеальным вариантом будет сдать анализ через 4-5 часов после дефекации; максимальное время, которое допускается хранить биоматериал – 12 часов.

Для обнаружения большинства вредных организмов можно взять вчерашний (вечерний) кал на анализ, однако чем раньше будет собран материал, тем лучше для обследования.

Для обнаружения яиц гельминтов (энтеробиоз) и прочих бактерий лучше всего брать кал из нескольких мест, а не отделять его единым блоком, т. к. в некоторых случаях эти бактерии не локализуются лишь в одном месте.

Тем, кто сдают кал при подозрении на скрытую кровь, за несколько дней до процедуры стоит отказаться от продуктов, содержащих большое количество железа, в частности мяса и субпродуктов.

К наиболее неблагоприятным продуктам относятся сердце, печень, легкие, язык и другие субпродукты, а также мясо курицы, кролика, баранины, свинины и телятины. Желательно не употреблять их, а также алкоголь, за три дня до обследования.

Немного отличается процедура взятия материала для проверки на энтеробиоз. В этом случае, как для детей, так и для взрослых используется соскобный метод.

Никакой подготовки не нужно: достаточно появиться в кабинете врача в назначенное время, где он возьмет образец материала с перианальных складок вокруг ануса.

Эта процедура полностью безболезненна и занимает всего несколько секунд, однако позволяет с большой точностью установить, есть ли яйца гельминтов в теле человека.

Подготовка к процедуре

Чтобы получить наиболее достоверный результат исследования, нужно обязательно соблюсти ряд условий.

Людям, страдающим запорами, нужно помнить, что нельзя использовать клизму или слабительные препараты для ускорения процесса дефекации.

Тем, кто все же хотят их использовать, можно сделать это за 3 дня до сбора материала в случае с клизмой, и за 2, если хотите принять слабительный препарат.

Запрет на применение дополнительных средств связан с тем, что срок формирования каловых масс в кишечнике при их приеме уменьшается, что значительно искажает копрограмму и не дает врачу возможности поставить пациенту правильный диагноз.

Например, при приеме препаратов не удастся установить наличие в кале крахмалов, жиров и других компонентов, которые содержатся в остатках непереваренной пищи и могут указывать на наличие у пациента панкреатита или других опасных заболеваний.

Женщинам лучше всего избегать сдавать анализы во время менструации, т. к. это гарантирует, что кровь не попадет в кал.

Если пациент до анализа проходит исследование ЖКТ с применением сульфата бария, то между обеими процедурами нужно выждать не менее двух суток, иначе результаты исследования также будут искажены.

Помимо этого, за несколько дней до исследования нельзя принимать медикаменты, влияющие на цвет, состав или другие показатели каловых масс.

К таким препаратам относятся активированный уголь, ректальные суппозитории, висмут и пилокарпин, а также другие средства – полный их перечень можно уточнить у врача.

Здоровое питание также поможет облегчить врачу изучение анализов, поэтому в 3-4 дня, предшествующие процедуре, лучше отказаться от продуктов, вызывающих запор, диарею и повышенное газообразование, а также способствующие окрашиванию каловых масс.

Какие болезни видно на анализе?

В зависимости от обнаруженных отклонений можно говорить о наличии у пациента той или иной проблемы.

Если в кале обнаружены лямблии, то пациенту может быть назначен дополнительный анализ крови, например, если материалы были сданы поздно и врач сомневается в правильности диагноза.

Но возможное наличие таких заболеваний, как энтеробиоз (яйца гельминтов в кале) – не единственная причина сделать копрограмму.

При подозрении на проблемы с органами пищеварения пациенту также, скорее всего, дадут направление на этот анализ. Если цвет фекалий будет изменен, то можно сделать вывод о поражении желчного пузыря.

Также кал теряет цвет при механической желтухе, которая обычно является предшественником почечной колики.

Черный цвет кала говорит о таких серьезных заболеваниях, как язва двенадцатиперстной кишки или желудка, варикоз вен пищевода, цирроз печени или кровотечение пищевода.

Наличие в фекалиях свежей крови может указывать на дизентерию, геморрой, язвенный колит, а также наличие трещин в анальном отверстии.

При хроническом панкреатите, а также других заболеваниях, вызывающих процессы гниения или брожения, кал может приобретать резкий неприятный запах, а также крупные частицы непереваренной пищи – все это очень просто будет увидеть на анализе.

Помимо свежей крови, возможно также наличие в фекалиях скрытой крови – ее можно увидеть только под увеличением микроскопа.

Ее наличие указывает на такие патологии организма, как язвенные болезни желудка или двенадцатиперстной кишки либо наличие полипов в желудке или гельминтозов в кишечнике.

В самом анализе нет ничего сложного или опасного, поэтому при любых показаниях его могут назначить как детям, так и взрослым, причем сдавать кал можно столько раз, сколько нужно, чтобы оценить качество лечения.

После заражения микроб появляется во многих средах организма. Так что становится возможным анализ на хеликобактер пилори по биохимии крови, слюне, калу и так далее. Вопрос об этом решается по наличию соответствующих возможностей у местной лаборатории. Анализ крови на проводится с целью выявить наличие антител IgG и некоторых других комплексов, формируемых под действием антигенов (CagA и другие). Расшифровка анализа ведётся по таблицам. Так норма в крови этих веществ известна.

Золотым методом у медиков считается вовсе не анализ крови на хеликобактер пилори. Рекомендуется сделать биопсию с последующим посевом образца на питательные среды. Это как результативный анализ хеликобактер, так и путь для определения чувствительности культуры к лекарственным препаратам.

В сыворотке быстро формируются антитела к хеликобактер пилори. Картина характеризуется количественным изменением интелейкинов:

1. Повышение числа IL-6, 8 и 10.
2. Снижение количества IL-2.

Однако в исследованиях, проведённых на подростках, обнаружено несоответствие картин у детей и взрослых. С 14 до 17 лет у людей не зафиксировано количественного изменения цитокинов. Подростки сдали кровь на хеликобактер, и не выявилось никаких различий по содержанию интерлейкинов, факторов некроза и интерферонов.

Что такое цитокины

Цитокины пока ещё недостаточно изучены, так что диагностика в этом плане носит скорее предположительный характер. О чем и было сказано выше. Медики пока ещё выясняют соотношения между понятиями хеликобактер пилори, анализ крови, норма и цитокины.

Описываемые структуры представляют собой белковые комплексы, формируемые как ответ иммунной системы. По конфигурации цитокины близки к гормонам, а функции их пока что не изучены. Вот некоторые предположения на этот счёт:

1. Контроль за производством клеток крови и их дифференцированием.
2. Балансировка иммунной системы.
3. Регулировка процессов воспаления.
4. Поддержание нормального давления крови и её свёртывания.

Цитокины сегодня постоянно пополняются новыми представителями класса. Медики делят их на классы следующим образом:

• Интерлейкины.
• Интерфероны.
• Хемокины.
• Монокины.
• Лимфокины.
• Колониестимулирующие факторы.

Когда велось исследование новой тогда ещё инфекции хеликобактер пилори, медики обнаружили в цифрах повышенный фон IL-1 бета и IL-6 (на слизистой, а не в крови). Со временем стало ясно, что неадекватные реакции иммунной системы, которая отказывается бороться с инфекцией и постепенно переключается на аутоиммунные реакции, обусловлены формируемыми цитокинами. Указанные вещества проникали в цитоплазму клеток и межклеточное вещество.

Вот почему сегодня положительный анализ крови расшифровывается, как источник проблем в области сердечно-сосудистой системы, кожных заболеваний, анемии и других. При в первую очередь фиксируется снижение уровня факторов некроза опухоли альфа, IL-8 и IL-1 бета.

Не все штаммы провоцируют подобные изменения, а те, которые содержат антиген CagA. IL-8 – провокатор воспаления в организме.

Антитела

Когда медики столкнулись с проблемой замены биопсии ввиду сложности проведения процедуры, то выдумали сонм иных методик. Исследования на антитела в крови относятся к этому разряду. Анализ считается неинвазивным, хотя проводится при помощи шприца. Первоначально исследование на антитела напоминало то, что проводится для кампилобактера. Посредством перекрёстной реакции антигенов медики решали вопрос о присутствии их в сыворотке крови.

Что касается исследований на специфические факторы, например, CagA, то было вынесено решение о нецелесообразности такого подхода из-за плохой чувствительности.

Наличие IgG не указывает на присутствие инфекции. Удаётся обнаружить при анализе этот фрагмент в течение продолжительного времени. Из-за резкого снижения носителей инфекции в развитых странах удаётся определить наличие IgG у тех, кто давно уже получил негативный статус присутствия микроба.

Постепенно титры антител падают. Требуется парный анализ (до и после лечения), чтобы понять, каков диагноз. Потому единые цифры не удаётся выявить для отдельно взятого пациента. Снижение титров длится десятилетиями. Сегодня медики предлагают оценивать успех лечения по 50% снижению за 6 месяцев. Этот признак отличается повышенной чувствительностью (97%) и специфичностью (95%).

Сегодня тесты на иммуноглобулины IgA и IgM не одобряются в развитых странах. Поскольку показатели достоверности желают лучшего.

Прочие маркеры присутствия инфекции

Помимо морфологических признаков, регистрируемых инструментальными методиками (гастрит, язва и так далее), выделяют клинические признаки, как например, сильный голод. Это обусловлено биохимическим составом крови – повышенным уровнем гастрина. Слабоположительный прирост уровня пепсиногена рассматривается как фактор риска развития язвы. Однако этот фактор указывает не на формирование заболевания, а выявляет в крови маркер присутствия хеликобактера.

Сначала этот признак отнесли к генетически заложенному в организме человека. Поскольку то же характерно при аутоиммунном гастрите. Однако повторный анализ ситуации показал, что бактерия – причина. Так что медики уровень пепсиногена и гастрина в крови считают весомым доводом в пользу выставляемого диагноза. Так при росте соотношения пепсиногенов I и II на 25% пора уже присмотреться. Фурута сообщает о специфичности этой методики в 90% случаев и чувствительности – 95%.

Гипотеза проверялась путём оценки титров IgG после лечения инфекции. Через 2 недели после излечения медики зафиксировали снижение гастрина. Однако, чтобы сдать тест крови по этой методики, придётся выполнить его дважды с интервалом 6-12 месяцев.

Анализ результата

Результат оценивается, например, по той сумме, которую дают антитела к хеликобактер (иммуноглобулины А, М и G):

1. 0,8 – суммарные показатели указывают на негативный ответ о наличии диагноза.
2. 0,8 – 1,1 – требуется дополнительное исследование.
3. Свыше 1,1 – значит, что в желудке локализована инфекция.

Исследования кала

Бактерия обнаруживается в испражнениях, так что анализ кала на хеликобактер – неотъемлемое исследования на бактерию. Однако стул анализируется на антиген. В США (штат Цинциннати) уже разработан комплект количественной оценки кала на наличие нужных молекул.

В основу заложен иммуноферментный анализ, чувствительность которого к антигену составляет 185 нг/мл. Подготовка сильно напоминает то, о чем было написано выше в отношении проб крови. На антитела из состава оборудования осаждаются антигены (посредством белковых механизмов идентификации). Однако это не даёт представления о том, как лечить инфекцию. То, что антиген в кале, показывает наличие бактерии в желудке.

Поликлональные антитела, связанные с пероксидазой, и пробу инкубируют в течение 1 часа. Затем материал наносится на лунки и выдерживается 10 минут. Связанный фермент изменяет цвет, регистрируемый спектрофотометрическими методами. Для фиксации результата (чтобы остановить процесс) добавляют стоп-раствор.

Результат по достоверности сравним с гистологическим исследованием биопсии. Медики даже не берутся сказать, какой самый точный. Однако ошибки (5%) все-таки встречаются. С биопсией это случается реже.

Медики обратили внимание на зависимость качества ингредиентов, поставляемых вместе с набором, а также значение профессионализма сотрудников лаборатории. Реактивы получают из подопытных кроликов, и стандартизация сильно осложнена из-за недостатка знаний о нужных технологиях.

Исследование кала по результативности сравнивается с тестом дыхательным. Этим путём проводится определение достоверности результатов, полученных по крови.

Методики оценки присутствия инфекции

Помимо того, как сдаётся анализ, как берут пробу, выделяют пути оценки нужных параметров. Выше приведены сведения о биохимических и иммуноферментных разновидностях. Но точный – ПЦР. Это клонирование участков ДНК при помощи специальных реакций, что позволяет обнаружить бактерию.

Этот метод считается сегодня перспективным. В особенности, когда речь идёт о дизентерии. ПЦР на определение микроба в кале затруднено, так как наличие специфических компонентов препятствует протеканию реакции. Это мешает правильно понять результаты. К тому же, некоторые участки ДНК схожи с теми, что выявлены у других бактерий (которых в испражнениях много). Поэтому тест в этом случае не считается оптимальным, а стоит дороже, нежели дыхательный.

Однако ПЦР позволяет быстрее обнаруживать мутации ДНК, обусловливающие резистентность класса к тем или иным медицинским препаратам. Так что достоверность отходит на второй план перед перспективами, открывающимися исследователям (в научном, а не клиническом смысле).

Общие инструкции по выбору

Из сказанного понятно, что одно обследование дополняет другое. Они не альтернатива друг другу. Проверяйтесь по той и другой методике, чтобы правильно диагностировать заболевание. Этим методы дополняют собой .

По большей части оба применяются уже после лечения для оценки успешности эрадикации. С целью определения титра, где повышен эффект присутствия антител. Если речь идёт о диагностике, то сдаётся в лаборатории кал. Поскольку так обнаруживается присутствие микроба в ЖКТ. Что касается крови, то наилучшие результаты получаются при двух разнесённых по времени пробах. Что далеко не во всех случаях уместно.

Чаще делается всё-таки дыхательный тест, который люди иной раз сдают в домашних условиях. А кровь при необходимости берётся медиками в клинике. Проверенным случаем считается тот, когда при ФГДС проводится взятие биопсии с последующим высеванием на питательную среду. Лучше пока что ничего не придумано.

А рассматриваемые виды – вспомогательные методики. Если речь идёт об экспресс-анализе, исследование кала помогает уточнить диагноз. Если о лечении – состояние крови характеризует результативность эрадикации. Желающим определить наличие микроба лучше начинать с дыхательного теста, как безобидного и простого в реализации.

Хеликобактер пилори

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) позволяет увеличить число копий ДНК бактерий или вирусов в миллионы раз с использованием фермента ДНК-полимеразы. Для диагностики достаточно одной молекулы ДНК. Синтезированное количество ДНК идентифицируют методами иммуноферментного анализа или электрофореза. ПЦР-диагностика позволяет обнаружить возбудителя на самых ранних этапах инфекционного процесса, в любой биологической среде организма, с возможностью количественного определения вирусов или бактерий.

Хеликобактер пилори – спиральные грам-отрицательные бактерии, которые были обнаружены на слизистой оболочке желудка более полувека назад, но они не вызывали особого интереса до начала 1980-х гг., когда был разработан метод культивирования организмов из биопсийного материала слизистой оболочки.

В 1983 г. австралийский врач Барри Маршалл обнаружил, что H. pylori почти всегда присутствует в желудке пациентов, страдающих хроническим гастритом или язвой. Бактерии, сами по себе, язвы желудка или двенадцатиперстной кишки не вызывают, однако, провоцируют воспалительные процессы в желудке и ослабляют естественную защиту слизистой от воздействия кислотной среды желудка; при этом H. pylori стимулирует гиперсекрецию соляной кислоты, воздействуя на механизмы ее регуляции. Если проводимая терапия приводит к снижению кислотности желудка, то язва может затянуться, но после прекращения лечения существует вероятность ее повторного возникновения. Длительные наблюдения показали, что у больных, не получавших лечение против H. pylori, язва рецидивирует через 2 года в 100 %, а у пролеченных пациентов возникает повторно (обычно вследствие реинфекции H. pylori) только в 5-10 %. Источником заражения H. pylori является инфицированный человек, кошки, свиньи, крупный рогатый скот и обезьяны (макака-резус). Чаще заражение происходит через загрязнённую фекалиями воду и пищу (овощи, при поливе которых использовалась загрязненная вода). Объектом передачи инфекционного начала могут быть загрязнённые руки, слюна, капли слюны или мокроты при кашле. Исследования, проведенные медиками из США, показали, что H.pylori можно считать семейной инфекцией, и, если в семье выявлен носитель H.pylori, то вероятность остальных членов семьи оказаться инфицированными составляет 95%. Обнаружение хеликобактера методом ПЦР позволяет значительно быстрее установить диагноз, проводить контроль лечения. Материалом для исследования могут служить желудочные аспираты, кал, слюна.

Обращаем Ваше внимание, что взятие урогенитального мазка, мазка из зева, носа, полости рта - платное.

Диагностический анализ на выявление в организме микроорганизма Хеликобактер Пилори посредством проведения ПЦР распространен во всем мире. Для проведения анализа достаточно сдать кал, никаких инвазивных процедур не требуется (как, например, в случае с ФГДС методом диагностики).

Самыми серьезными минусами этой процедуры считают сравнительно низкую точность и неудобство в сдаче материала для анализа.

ПЦР анализ на наличие в желудочно-кишечном тракте бактерии Хеликобактер Пилори проводится практически во всех, как государственных, так и частных медицинских центрах, в которых имеется своя лаборатория. Назначение на проведение данного вида исследования можно получить у врача-терапевта, гастроэнтеролога и иммунолога.

Прохождение исследования по направлению актуально только для государственных медицинских учреждений. В частных центрах анализ можно проводить без направления, просто по собственному желанию.

Процедура это платная. Цена на ПЦР обследование может отличаться в зависимости от клиники и от города. Например, в Москве данное исследование стоит около 600 рублей, тогда как в регионах обойдется в 250-350 рублей. В частных клиниках, по данным на 2016 год, цена выше на 5-10%: в районе 650 рублей для столицы.

Насколько точен тест?

Современные исследования указывают на достаточно высокую точность ПЦР анализа кала на наличие бактерии Helicobacter Pylori. Чувствительность теста колеблется в диапазоне между 64-94%.

Некоторых пациентов может смутить столь большой разброс в чувствительности теста. Однако стоит понимать, что в медицине нет идеально точных диагностических методик, а показатель в 64-94% является более чем удовлетворительным. Для более точного диагноза следует сочетать этот метод с другими способами выявления Хеликобактер (анализ крови, дыхательный тест, и так далее).

Диагностика и лечение Хеликобактер (видео)

Преимущества и недостатки метода

К преимуществам ПЦР анализа кала относят:

1. Немалую чувствительность (точность) метода.
2. Не требуется инвазии (проникновения, как при ФГДС) для выполнения процедуры, а сама процедура технически очень проста.
3. Абсолютная безопасность для здоровья пациента.
4. Возможность обнаружения различных штаммов и форм бактерии Helicobacter Pylori.
5. Возможность с этой же пробы сразу провести анализы и на другие заболевания.

К недостаткам ПЦР анализа кала относят:

• невозможность определения чувствительности к антибиотикам;
• невозможность отличить прошедшую инвазию Хеликобактер Пилори от существующей;
• сам метод доступен не в каждом медицинском центре.

Общее описание и виды метода

ПЦР тест на наличие в ЖКТ микроорганизма Helicobacter Pylori основан на молекулярно-генетическом анализе многократного умножения образца бактерии Хеликобактер Пилори. Стоит отметить, что для этого метода диагностики берется не кровь, а кал.

ПЦР анализ проводится с помощью двух способов:

• культурального;
• иммунологического.

При культуральном ПЦР анализе биологический материал кладут в чашку Петри, в которой заблаговременно создаются благоприятные условия для размножения Хеликобактер Пилори.

Через 5-7 дней проводится осмотр чаши и если в ней за этот срок развилась колония микроорганизма Helicobacter Pylori, то результат является положительным. К сожалению, на точность этого метода могут повлиять выпитые накануне антибиотики, о чем пациенты должны быть осведомлены.

При иммунологическом виде ПЦР анализа маркированные антитела помещают в анализируемый образец. В итоге, при наличии бактерии Хеликобактер Пилори, можно увидеть образование специфических комплексов антиген-антитело, что говорит о положительном результате анализа.

Подготовка и сдача анализа

За трое суток до проведения теста следует отменить прием антибиотиков, слабительных средств, ректальных свеч и замедляющих перистальтику лекарств. При невозможности отмены препаратов из списка (по жизненным показаниям) требуется консультация с врачом.

Сбор кала для анализа осуществляется исключительно в выданную в больнице или лично приобретенную специальную медицинскую тару (ее можно купить в любой аптеке).

Доставлять исследуемый биоматериал нужно как можно быстрее. При невозможности быстрой транспортировки следует хранить тару с биоматериалом при температуре в +3-9 градусов, но не более суток с момента сбора.

Важно: если анализ проводится повторно, после проведения антибактериальной терапии, тест нужно проводить не ранее четырех недель после окончания лечения. В иных случаях он будет неэффективен и покажет ложный результат.

Расшифровка и нормы

Расшифровка результатов для бактериологического метода ПЦР исследования:

• количество микроорганизмов 0 - микроорганизм Хеликобактер Пилори не выделен (норма);
• количество больше 0 - наличие хелибактериоза (подтверждается даже в том случае, если больной не имеет симптомы болезни), требуется лечение;
• S - чувствительность к указанному в результате антибиотику;
• R - резистентность (полная устойчивость) к указанному в результате антибиотику;
• I - умеренная чувствительность к указанному в результате антибиотику.

Расшифровка результатов для иммунологического метода ПЦР исследования:

• отрицательный результат - микроорганизм Helicobacter Pylori не выделен;
• положительный результат - наличие хеликобактериоза, требуется лечение.