Иммуногистохимия: полное описание метода. Иммуногистохимическое исследование — показания и особенности проведения Игх обследование

Онкологические заболевания грудных желез диагностируются у женщин довольно часто. Поэтому диагностические мероприятия, позволяющие обнаружить опасную опухоль, не теряют актуальность. Иммуногистохимическое исследование при раке молочной железы предназначено для определения восприимчивости злокачественных клеток к конкретным веществам. Посредством исследования выясняют, корректно ли осуществляемое лечение.

ИГХ – что это за исследование?

Применяемое в онкологии иммуногистохимическое исследование позволяет обнаружить взаимосвязь между белками, синтезируемыми злокачественными клетками, и антигенами. Выявив эту связь, специалисты устанавливают вид и структуру новообразования.

Цель исследования

ИГХ при онкологических патологиях грудных желез осуществляют, чтобы:

установить вид заболевания, восприимчивый к определенной терапии;
, пущенные опухолью, и степень их распространения;
найти источник метастазов;
установить стадию развития выявленной опухоли;
оценить действенность терапии;
узнать скорость распространения метастазов;
выявить чувствительность кровяных клеток к конкретным лекарственным веществам для отсеивания неэффективных медикаментов.

Показания к ИГХ

Диагностическое исследование применяется для определения состояния любой части человеческого организма. Назначают процедуру не только при раке грудных желез, но и при любых новообразованиях, предположительно являющихся злокачественными. Посредством ИГХ определяют состояние эндометрия при:

появлении метастазов;
патологиях матки;
бесплодии;
неудачных процедурах ЭКО;
болезнях органов тазовой области, имеющих разную этиологию;
постоянном самопроизвольном прерывании беременности.

Противопоказаний к проведению процедуры нет. Отказываются от исследования, только если по каким-либо причинам у пациента невозможно взять биоматериал.

Подготовка к исследованию

Перед процедурой пациентка:

не должна принимать гормональные лекарства (за неделю до взятия биоматериала);
не должна принимать медикаменты для остановки крови;
должна провести тщательные гигиенические процедуры.

Исследование проводят в конкретные дни менструального цикла:

на 5 – 7 день изучают патологические изменения эндометрия;
на 20 – 24 день оценивают секреторную и рецепторную деятельность.

Ход исследования

Для проведения иммуногистохимического теста методом биопсии забирают некоторое количество опухолевой ткани грудной железы. Забор осуществляется на участке, где специалист подозревает скопление злокачественных клеток.

Перед процедурой медик отмечает выбранную точку на груди пациентки. Также на анализ могут взять куски опухоли , вырезанные при хирургическом вмешательстве.

Собранный биоматериал относят в лабораторию.
Опухолевые образцы опускают в емкость с формалином.
Биоматериал обезжиривают.
Вливают парафиновую жидкость, позволяющую определить структуру и вид опухолевых тканей.
Отрезают кусок опухоли толщиной 1 мм.
Кладут на лабораторное стекло.
В качестве красителей используют химические реагенты и антитела.
Итоги теста готовы спустя две недели.

Для обнаружения рака молочных желез берут разные маркеры. Если по итогам теста выявлено наличие в опухолевых тканях значительного количества женских половых гормонов, то опухоль активно развивается. Возможно даже, что уже пошли метастазы. Если скопление гормонов среднее, то злокачественные клетки размножаются неактивно. А значит, при грамотном и своевременном лечении у пациентки есть возможность восстановить здоровье.

Положительный итог гормонального лечения возможен, если маркер Ki-67 при злокачественной опухоли молочной железы не превышает 15 – 17%. Новообразование стремительно растет, если маркер достигает 35%. В этой ситуации незамедлительно осуществляется химиотерапия, позволяющая затормозить размножение злокачественных клеток. Если же маркер выше 85%, то проводить лечение уже поздно, смертельный исход неизбежен.

Расшифровка результатов

Расшифровывая результаты, смотрят на прогестероновые (PR) и эстрогеновые (ER) рецепторы. При ИГХ также определяют количество рецептора человеческого эпидермального фактора роста (белок HER-2) во взятом у пациентки биоматериале. При злокачественной опухоли молочной железы HER-2 повышен.

При повышенном ER и PR в опухолевых тканях можно говорить, что злокачественное образование растет под воздействием гормонов. Если концентрация ER и PR не выходит за пределы нормы или выходит незначительно, то пациентка может надеяться на успешное лечение.

Расшифровывают показатели ИГХ по специальной цветовой шкале, соотнося цвета на шкале с оттенками биоматериала.

0 и +1. Концентрация белка соответствует норме. Терапевтические мероприятия не нужны.
+2. Концентрация белка средняя. В грудной железе присутствует злокачественная опухоль. Обычно проводят дополнительное исследование, чтобы подтвердить верный результат первого теста. Дополнительное исследование называется FISH, позволяет узнать содержание белка в каждой клетке. Если HER-2 в норме, то FISH-тест даст положительный результат, если повышен, то отрицательный.
+3. Концентрация белка намного выше нормального значения. Однозначно в грудной железе присутствует злокачественное новообразование.

Если тест показал высокую концентрацию белка, то опухоль агрессивного типа, растет интенсивно.

По результатам ИГХ выделяют 4 вида рака груди:

– рецепторы ER положительны, рецепторы к белку отрицательны, Ki-67 ниже 14%;
Б-люминальный – рецепторы ER и HER-2 отрицательны, Ki-67 выше 15%;
сверхэкспрессирующий – рецепторы ER и PR отрицательны, рецепторы к белку положительны;
базальноподобный – все рецепторы отрицательны.

Прогностические маркеры

По ним определяют наиболее вероятное поведение новообразования на момент проведения теста. Нет влияния терапии на исследование. Тест позволяет определить агрессивность опухоли. Прогноз важен для подбора наиболее подходящих медикаментов и лечебных процедур.

Диагностические маркеры

Исследование показывает действенность проводимого лечения. Если обнаружено наличие агрессивного рака, то назначают химиотерапию.

ИГХ – сложный тест, при котором используют большое количество Чем больше маркеров проверяют, тем выше стоимость исследования. Тест эффективен в определении вида онкологического заболевания, помогает назначить оптимальную терапию.

Иммуногистохимическое исследование при раке молочной железы – это анализ, который позволяет определить чувствительность новообразования злокачественного характера к некоторым веществам. С его помощью диагностируют стадию патологии и узнают, правильно ли было назначено лечение.

Что такое ИГХ?

Если говорить о том, что такое ИГХ онкологии, то это исследование, позволяющее выявить взаимодействие между белками и антигенами. Дело том, что клетки, пораженные онкологией, синтезируют белок. Он имеет связь с антителами. Учитывая это, специалисты с помощью анализа определяют форму и структуру опухоли.

Зачем проводят ИГХ?

ИГХ при проводят с целью:

определения вида заболевания для назначения терапии;
раскрытия наличие метастаз, идущих от опухоли, и их границы;
обнаружения источника метастаз;
диагностирования стадии патологии при ее выявлении;
оценки эффективности терапии;
установления скорости развития метастаз при наличии таковых;
выявления чувствительности клеток крови к тем или иным препаратам и методам лечения, чтобы оставить эффективные средства и исключить те медикаменты и способы терапии, которые не влияют на опухоль.

Как делается анализ?

Иммуногистохимия рака молочной железы проводится путем забора ткани, пораженной онкологией. Биоматериал добывается с помощью биопсии или в процессе оперативного вмешательства. После этого выполняется анализ по следующим этапам:

биоматериал помещается в формалин, после чего переправляется в лабораторию для проведения дальнейших манипуляций;
специалисты обезжиривают ткань;
в материал добавляется специальный жидкий парафин, который помогает выявить структуру клеток опухоли;
выполняется микротравмирование – процедура срезания тонкого слоя парафина, толщиной в 1 мм;
взятые образцы размещаются на специальных стеклах;
выполняется окрашивание материала с помощью реактивов;
образцы оставляют на 12 дней, после чего оценивают результат.

Для проведения анализа используют несколько видов маркеров. Если в ходе исследования в биоматериале обнаружена повышенная концентрация эстрогенов и прогестеронов, делают заключение о развитии опухоли. Это также говорит о появлении метастазов от новообразования. Если анализ показал средние результаты, то говорят о слабом росте опухоли. Это говорит о том, что больной после соответствующей терапии имеет все шансы на выздоровление.

Чисто рецепторов HER2 влияют на цветовую гамму реакторов с клетками, которые поражены раком. Чем их больше, тем ярче тон. В этом случае гистология проявляется себя, как неточная наука, поскольку восприятие оттенков образцов субъективное и зависит только от ощущений специалиста, выполняющего анализ.

Расшифровка результатов

При расшифровке результатов учитывают рецепторы к прогестерону – PR и эстрогену – ER. ИГХ в онкологии также показывает содержание рецептора человека эпидермального фактора роста (HER2-белка) в биоматериале, который взят как образец для проведения исследования. У женщин с карциномой молочной железы наблюдается повышенный HER2.

Расшифровка результатов по эстрогену и прогестерону – если в опухоли обнаружены рецепторы к мужским и женским гормонам, то рост образования происходит под их воздействием, если PR и ER в организме присутствуют в норме или их концентрация увеличена. При своевременном квалифицированном лечении пациент может рассчитывать на благоприятном исходе.

Расшифровка результатов ИГХ выполняется в зависимости от оттенка образцов по специальной шкале:

0-1+. Такой результат говорит о том, что концентрация белка не превышена. Терапия патологии не требуется.
2+. Значение указывается на среднюю концентрацию белка. Это говорит о наличии отрицательной опухоли (карциномы) груди. В этом случае рекомендуется выполнить еще один анализ, поскольку первое исследование не всегда дает точный результат. Для уточнения диагностики выполняют тест FISH. Такое исследование определяет концентрацию белка в каждой клетке. При нормальном содержании HER2 анализ покажет положительный результат, а при повышенном – отрицательный.
3+. Белок превышает нормальное значение. Диагностируется положительная опухоль груди.

Если анализ показал положительную опухоль, значит, патология имеет агрессивный характер развития. Она растет в несколько раз быстрее, чем при отрицательном значении.

После изучения исследования, расшифровывается результат, исходя из показателя маркера Ki67. Если его значение находится в пределах нормы, то есть 15-17%. При повышении его уровня до 35% опухоль начинает быстро расти. Замедлить процесс помогает химиотерапия. Если анализ показал 85%, врачи отказываются от лечения пациента, поскольку снизить маркер в таком случае невозможно и смертельного исхода не избежать.

Выделяют 4 типа рака:

люминальный А – рецепторы к ER положительные, к белку отрицательные, Ki67 менее 14%;
люминальный Б – рецепторы к ER, к HER2 – отрицательные, Ki67 более 15%;
Erb В2 сверхэкспрессирующий — PR и ER – отрицательный, белок – положительный;
Базальноподобный – отрицательное значение к прогестерону и остальным факторам.

Прогностические факторы

Такие факторы демонстрируют возможное поведение опухоли на момент анализа. Лечение не оказывает влияние на исследование. Врач благодаря ИГХ видит, как ведет себя опухоль. Прогнозом специалист пользуется для определения подходящей терапии для каждого пациента.

Предсказывающие факторы

Исследования ИГХ рака молочной железы позволяют определить эффективность лечения. Если анализ показал положительный рак, то назначают химиотерапию. При отрицательном значении – прием медикаментозных препаратов.

ИГХ – это исследование, которое позволяет определить вид рака молочной железы и назначить адекватное лечение, что позволяет спасти пациентке жизнь, а в некоторых случаях – избавиться от патологии.

Важнейшим пунктом при диагностике раковых заболеваний является иммуногистохимическое исследование. Ежедневно в организм человека проникают микроорганизмы, способные запустить развитие патологического процесса. Защитные силы противостоят этому, образуя антитела. Эта реакция и легла в основу создания ИГХ-исследования.

Суть метода

Данный способ диагностики раковых заболеваний является наиболее современным и достоверным. В процессе развития опухолевого процесса образуются чужеродные организму белки - антигены. В это же время иммунная система вырабатывает антитела, главная цель которых - предотвращение размножения патогенных микроорганизмов.

Задачей иммуногистохимического исследования является своевременное выявление раковых клеток. Для этого биологический материал пациента обрабатывается множеством антител, после чего тщательно изучается под микроскопом. Если данные белковые соединения свяжутся с опухолевыми клетками, будет визуализироваться их свечение. Возникновение эффекта флюоресценции и свидетельствует о наличии в организме раковых клеток.

На сегодняшний день в распоряжении специалистов, осуществляющих ИГХ-исследование, имеются практически все антитела к различным видам опухолей, что служит залогом получения достоверных результатов.

Возможности

Современный вид диагностики позволяет определить:

распространение опухолевого процесса;
скорость роста злокачественных новообразований;
вид опухоли;
источник метастазов;
уровень злокачественности.

Кроме того, с помощью иммуногистохимического исследования может оцениваться степень эффективности лечения раковых заболеваний.

Показания и противопоказания

С помощью данного способа существует возможность изучения любых тканей человеческого организма. Главным основанием для назначения иммуногистохимического исследования является подозрение о наличии злокачественного образования.

В этом случае метод используется для:

определения вида опухоли и области её локализации;
обнаружения метастазов;
оценки активности ;
выявления патологических микроорганизмов.

Также анализ эффективен при проблемах с зачатием.

Иммуногистохимическое исследование эндометрия показано при:

бесплодии;
заболеваниях матки;
наличии патологий в органах репродуктивной системы;
невынашивании беременности;
хронических заболеваниях эндометрия.

Кроме того, ИГХ-исследование назначается пациенткам, у которых не наступает беременность даже после нескольких попыток экстракорпорального оплодотворения. Метод позволяет определить, имеются ли в организме клетки, снижающие вероятность зачатия.

Противопоказаний к ИГХ-исследованию не существует. Единственным фактором, из-за которого невозможно провести анализ, является непреодолимая сложность при заборе биоматериала пациента.

Как проводится

В первую очередь методом биопсии получают образец ткани больного. Реже забор материала осуществляется в процессе эндоскопического обследования или хирургического вмешательства. Способ получения образца зависит от вида опухоли и её локализации.

Важным нюансом является то, что забор материала при первичном обследовании должен осуществляться до начала лечения. В противном случае результаты исследования могут быть искажены.

После забора биоматериала его помещают в формалин и отправляют в лабораторию, где он подвергается следующей обработке:

Образец ткани обезжиривается и заливается парафином. В данном виде биологический материал может храниться очень долго, за счёт чего ИГХ-исследование может быть проведено повторно.
С образца собирают несколько тонких срезов и перемещают их на специальные стёкла.
На них биоматериал окрашивается растворами различных антител. На данном этапе может применяться как малая панель, так и большая. В первом случае изучаются реакции после использования 5 видов антител, во втором - до нескольких десятков.
В процессе иммуногистохимического исследования при раке любого органа появляется эффект флюоресценции, что даёт возможность специалисту определить вид злокачественных клеток.

Интерпретация результатов

Как правило, заключение готово через 7-15 дней. Срок зависит от вида используемой панели (малой или большой). Расширенный способ занимает больше времени.

Изучением срезов биоматериала занимается патологоанатом, имеющий знания и навыки (подтверждённые официальным документом), необходимые для проведения анализа.

При интерпретации результатов особое внимание обращается на показатель Ki-67. Именно он предоставляет информацию о степени злокачественности процесса. Например, если результат показателя после проведения иммуногистохимического исследования при раке молочной железы составляет не более 15%, считается, что прогноз более чем благоприятный. Уровень в 30% свидетельствует об активности опухолевого процесса, т.е. о быстрой скорости его развития. Как правило, она останавливается после курса химиотерапии.

По некоторым статистическим данным, если Ki-67 составляет менее 10%, итог заболевания будет благоприятным (в 95% случаев). Отметка в 90% и выше означает почти 100%-ный летальный исход.

Кроме показателя злокачественности, в заключении указываются:

антитела, к которым выявлено сходство (тропность);
вид раковых клеток, их количественное значение.

Важно понимать, что точный диагноз ставится после получения и изучения информации, собранной посредством всех проведённых диагностических процедур. Несмотря на то, что ИГХ-анализ считается наиболее информативным методом по сравнению с гистологией, иногда необходимо использовать оба способа. Расшифровкой иммуногистохимического исследования занимается исключительно онколог.

В заключение

В современной медицине особое внимание уделяется диагностике раковых заболеваний. Наиболее современным и информативным методом считается С его помощью выявляется не только наличие но и определяется их вид и скорость развития злокачественного процесса. Кроме того, на основании результатов производится оценка эффективности назначенного лечения.

Метод определения Гистологическое исследование биоптата согласно гистологической классификации Всемирной организации здравоохранения (ВОЗ) с окрашиванием гематоксилином-эозином. ИГХ-исследование с применением спектра тканеспецифичных и прогностических антител (до пяти антител) (пероксидазный и авидин-биотиновый методы).

Исследуемый материал Смотрите в описании

Доступен выезд на дом

Комплексное исследование биоптатов метастатических образований различных локализаций, включающее морфологическое описание и оценку экспрессии спектра тканевых маркеров, для определения гистогенеза первичного опухолевого очага.

По статистике, в 3-15% случаев злокачественные опухоли манифестируют метастазами. Метастазы без выявленного первичного очага характеризуются случайной, нетипичной локализацией и быстрым прогрессированием процесса. Средняя продолжительность жизни пациентов с тремя и более метастатическими очагами поражения составляет три месяца. При этом локализация первичного очага у 60-70% пациентов выявляется только на аутопсии. Своевременная ИГХ-диагностика определяет тактику лечения до выявления первичного очага.

Патоморфологическая диагностика метастазов невыявленных опухолей предусматривает определение их морфологического типа, уточнение вероятного источника метастазирования, оценку злокачественного потенциала. Первая задача решается при рутинном гистологическом исследовании биопсийного материала (окрашивание гематоксилином-эозином), вторая - применением специальных методов исследования: гистохимического, иммуногистохимического (ИГХ) или молекулярно-генетического метода FISH (Fluorescence In Situ Hybridization).

При рутинной морфологической диагностике метастатические опухоли, согласно рекомендациям Европейского общества медицинской онкологии ESMO (European Society for Medical Oncology) (2004), разделяются на пять крупных категорий: аденокарцинома, плоскоклеточный рак, нейроэндокринный рак, недифференцированный рак, недифференцированная опухоль. Эти морфологические категории, наряду с данными о распространенности процесса, во многих случаях позволяют определить адекватный план обследования (и лечения). Так, например, при выявлении метастаза плоскоклеточного рака в шейных лимфатических узлах необходимо эндоскопическое обследования органов верхних дыхательных и пищеварительных путей. ИГХ-исследование, в зависимости от морфологического типа новообразования, позволяет уточнить гистогенез опухоли и/или определить вероятную локализацию первичного очага.

Для ИГХ-исследования первичных опухолей и их метастазов используется широкий спектр тканеспецифичных маркеров: -цитоспецифичные (кластеры дифференцировки лейкоцитов (CD – Clusters of Differentiation), гладкомышечный актин, миоглобин, тиреоглобулин); -маркеры пролиферации (Ki67, PCNA – Proliferating Cell Nuclear Antigen); -опухолевые маркеры – онкофетальные антигены (фетопротеин, карциноэмбриональный антиген); -гормоны (эстроген, прогестерон); -ферменты, белковые продукты клеточных онкогенов и др.

Единых алгоритмов при ИГХ-исследовании метастазов опухолей без уточненного первичного очага не разработано. Корректное определение направления дифференцировки опухолевых клеток и ряда биологических параметров опухоли само по себе является показанием для назначения определенных схем терапии. Например, обнаружение метастазов аденокарциномы в лимфоузлах подмышечной области может являться показанием к проведению терапии, аналогичной терапии рака молочной железы соответствующей стадии. Обнаружение экспрессии рецепторов эстрогенов и прогестерона в такой аденокарциноме может стать показанием к назначению антигормональной терапии вне зависимости от наличия определяемого опухолевого узла в молочной железе. Пример алгоритма, рекомендуемого для использования в дифференциальной диагностике.

Материал для исследования: биоптат опухоли, фиксированный в парафиновом блоке.

Литература

Blaszyk H., Hartmann A., Bjornsson J. Cancer of unknown primary: clinicopathologic correlations. APMIS. 2003;111(12):1089-1094.
Dabbs D.J. Diagnostic Immunohistochemistry: Theranostic and Genomic Applications. Elsevier, 4-th Edition. 2013:960.
Di Patre P.L., Carter D. Sternberg"s Diagnostic Surgical Pathology Review. Wolters Kluver, 2-nd Edition. 2015:488.
Dietal M., Wittekind С., Bussolati G., von Winterfeld М. Pre-Analytics of Pathological Specimens in Oncology. Sрringer. 2015:133.
Dodd L.G, Bui M.М. Atlas of Soft Tissue and Bone Pathology. DemosMEDICAL. 2014:720.
Edge S.B, Byrd D.R., Compton C.C., Fritz A.G., Greene F.L., Trotti A. AJCC Cancer Staging Manual. Sрringer, 7-th Edition. 2011:646.
Elder D.E. Lever"s Histopathology of the Skin. Wolters Kluver, 11-th Edition. 2014:1544.
Epstein J., Netto G. Biopsy Interpretation of the Prostate. Lippincott Williams and Wilkins, 5-th Edition. 2014:450.
Erickson L. Atlas of Endocrine Pathology. Sрringer, 1-st Edition. 2014:178.
ESMO Minimum Clinical Recommendations for diagnosis, treatment and follow-up of cancers of unknown primary site. Annals of Oncology. 2005;16(S.1):175-176.
Fletcher C.D.M., Bridge J.A., Hogendoorn P., Mertens F. WHO Classification of Tumours of Soft Tissue and Bone. WHO Press, 4-th Edition. 2013;5:427.
Kurman R.J., Carcangiu M.L., Herrington C.S., Young R.H. WHO Classification of Tumours of the Female Reproductive Organs. WHO Press, 4-th Edition. 2014;4:316.
Louis D.N., Ohgaki H., Wiestler O.D., Cavenee W.K. WHO Classification of Tumours of the Central Nervous System. WHO Press, 4-th Edition. 2007;1:312.
Malpica A., Euscher Е.D. Biopsy Interpretation of the Uterine Cervix and Corpus. Wolters Kluver, 2-nd Edition. 2015:368.
Nishizuka S., Chen S.T., Gwadry F. et al. Diagnostic markers that distinguish colon and ovarian adenocarcinomas: identification by genomic, proteomic, and tissue array profiling. Cancer Research. 2003;63:5243-5250.
Nordi Q.C. http://www.nordiqc.org.

Иммуногистохимическое исследование в онкологии – это разновидность исследования ткани с помощью специальных реактивов по принципу антиген-антитело .

При используются реактивы, которые содержат антитела, отмеченные специальными веществами.

Антитело – это белок, который связывается в тканях с определенными молекулами - антигенами, после чего возникает реакция. Если же таких молекул нет, то и реакции не будет.

По этому признаку можно судить, присутствует в ткани интересная нам молекула или нет. Это похоже на то, если нанести на белый стол бесцветный клей. Невооруженным глазом на белом фоне он практически незаметен, но стоит насыпать на стол мелкого песка, как клей становится виден за счет прилипших песчинок.

По правилам иммуногистохимическое исследование при раке всегда проводится в специализированной лаборатории. Для его проведения необходима опухолевая ткань, полученная в результате или операции.

Иммуногистохимическое исследование проводится для определения наличия в опухолевых клетках различных точек приложения, например, наличие рецепторов эстрогенов (ER) и прогестеронов (PR). Также иммуногистохимия выполняется для определения показателя Ki-67 (индекс пролиферативной активности опухолевых клеток), гиперэкспрессии белка Her2neu, VEGF (сосудистый фактор роста), р53.

Иммуногистохимическое исследование при раке выполняется для того, чтобы понять, какими препаратами можно лечить злокачественную опухоль, и к каким видам препаратов она чувствительна.

Самый распространённый анализ, определяемый при иммуногистохимическом исследовании , это наличие рецепторной чувствительности к гормонам у опухоли.

1. ER / PR (Эстрогеновые и прогестероновые рецепторы, ER- еstrogen receptor, PR-progesterone receptor)

ER и PR - протеиновые рецепторы на поверхности опухолевых клеток.

В организме человека постоянно вырабатываются гормоны - эстроген и прогестерон. Эти гормоны воздействуют на ER и PR рецепторы, что приводит к стимуляции роста опухолевых клеток.

Определение Эстрогеновых и Прогетестероновых рецепторов является одним из важнейших моментов, определяющих чувствительность опухоли к терапии гормональными препаратами.

Чаще всего наличие рецепторов ER/PR определяют при . Их наличие дает возможность, помимо стандартных методов лечения, применить гормональную терапию .

При гормон позитивном раке молочной железы, назначаются препараты: Тамосксифен, Экземестан (Аромазин), Летрозол (Фемара), Анастразол (Аримидекс), Гексэстрол (Синестрол) и другие.Также, считается, что гормонально-зависимый рак молочной железы отличается спокойным течением и редким .

Чувствительность опухолевых клеток к гормональной терапии выражается в баллах от 0 до 10 . Опухоль считается гормонозависимой, начиная с 2-х баллов. и требует добавления к лечению гормональной терапии.

2. Her2Neu (от англ. Human Epidermal Growth Factor Receptor 2)

Her2Neu - это рецептор эпидермального фактора роста раковой клетки. Это - ген, который воздействует на мембранные рецепторы клетки, и стимулирует её к усиленному делению.

В некоторых опухолях (чаще всего , ) присутствует гиперэкспрессия (повышенная активность) Her2Neu , что вызывает быстрое деление опухолевой клетки и её повышенную активность.

Также снижается эффективность , гормональной терапии . Из-за этого опухоли с Her2neu позитивным статусом отличаются агрессивным течением.

Существует две методики определения наличия у опухоли гена Her2neu:

Результаты иммуногистохимического исследования выражаются в баллах:

0-1 означает, что опухоль без гиперэкспрессии Her2neu.
3 означает, что опухоль с гиперэкспрессией Her2neu.

2. Метод FISH (Флуоресцентная гибридизация in situ)

В отличие от иммуногистохимического исследования, при котором определяются белки, при методе FISH определяется наличие генов, кодирующих протеины Her2neu. В зависимости от их наличия, определяется гиперэкспрессия Her2neu .

Определение гиперэкспрессии рецептора Her2neu в опухоли молочной железы является очень важным для дальнейшего назначения лечения.

В современной онкологии гиперэкспрессию Her2neu определяют, чтобы понять, необходимо ли добавление к лечению ингибиторов Her2neu. Для лечения опухолей с гиперэкспрессией рецептора Her2Neu активно и успешно используются Трастузумаб (Герцептин), Пертузумаб (Перьета), Трастузумаб-эмтанзин (Кадсила), Бейодайм (Трастузумаб+Пертузумаб) . Эти препараты прицельно блокируют рецепторы Her2neu, тем самым останавливая активный рост опухолевых клеток и повышая их чувствительность к химиопрепаратам. Добавление таргетной терапии к стандартной химиотерапии при лечении Her2neu позитивных опухолей, серьезно увеличивает общую выживаемость и результат противоопухолевого лечения.

3. Ki-67

Ki-67 - это маркер пролиферативной активности опухолевой клетки. Данный параметр оценивается в процентах и показывает, сколько процентов опухолевых клеток активно делятся.

Если Ki-67 меньше 15%, опухоль считается слабоагрессивной, при показателе Ki-67 от 30 до 50% опухоль считается агрессивной, а при показателе Ki-67 выше 50% опухоль является высокоагрессивной.

Также Ki-67 является фактором прогноза течения опухолевого заболевания и ответа опухоли на химиотерапевтическое лечение. Определяется это простым способом: чем ниже показатель Ki-67 , тем хуже опухоль реагирует на химиотерапевтическое лечение . И наоборот - чем выше показатель Ki-67 , тем лучше опухоль будет отвечать на химиотерапию.

4. Белок p53

Белок p53 - это транскрипционный фактор, регулирующий клеточный цикл. В быстро делящихся клетках обнаружено увеличение концентрации белка р53 по сравнению с клетками, делящимися медленно, что обусловлено высоким риском их онкогенности.

Белок p53 предотвращает образование злокачественных опухолей в нашем организме. В норме, антионкоген р53 находится в неактивном состоянии, а при появлении повреждений ДНК в здоровой клетке - активируется.

Функция белка р53 состоит в удалении тех клеток, которые являются потенциально онкогенными. Это называется - индуцированный апоптоз, уничтожение потенциально опасной клетки.

При иммуногистохимическом исследовании, повышенное содержание белка p53 обнаруживается в 50% злокачественных клеток, что позволяет им беспрепятственно делиться и избегать апоптоза (уничтожения).

Количество белка p53 , определяют в дополнение к показателю Кi67, для того, чтобы понять насколько агрессивна опухоль и определить дальнейшее течение болезни. Если уровень белка p53 высокий, значит опухоль не агрессивная и не склонна к метастазированию и быстрому росту. Если же, показатель белка p53 низкий, то значит опухоль агрессивна и склонна к быстрому росту в окружающие ткани и метастазированию .

5. VEGF (Фактор роста эндотелия сосудов)

VEGF – это сигнальный белок, вырабатываемый клетками для активного роста новых сосудов в уже существующей сосудистой системе.

Есть несколько видов белка VEGF, и каждый воздействует на определенный рецептор VEGFR (Vascular endothelial growth factor receptor). Для того чтобы активно делиться, опухоли нужно питание, а для этого нужны сосуды, по которым это питание будет поступать. Именно по этой причине в опухолевых клетках содержится повышенное содержание белка VEGF - для того, чтобы в короткие сроки строить сосудистые сети.

Наличие белка VEGF в опухоли говорит о возможности применения такими препаратами, как Бевацизумаб (Авастин), Рамуцирумаб (Цирамза), Афлиберцепт (Залтрап). Они перестраивают сосудистую сеть опухоли, тем самым лишая её питания.

6. Определение экспрессии белков PD-1, PDL-1 и PDL-2

Для того чтобы отобрать пациентов, которым показана иммунотерапия, проводится определение наличия экспрессии PD-1 и его лиганд PDL-1 и PDL-2, при помощи флюоресцентной гибридизации in situ (FISH) . При наличии экспрессии PD-1 и его лиганд PDL-1 и PDL-2, показано применение иммунотерапии препаратами Пембролизумаб (Кейтруда), Ниволумаб (Опдиво), Атезолизумаб (Тецентрик).

В современной онкологии иммуногистохимическое исследование играет очень важную роль, так как при помощи этого исследования онкологи определяют наличие тех или иных факторов в опухоли, которые позволяют грамотно и адекватно составить дальнейшее лечение пациента и говорить о прогнозах заболевания.