Значение анализа на rpr 1 2. Рпр анализ крови что это

по применению «Люис RPR тест»

Набор реагентов для быстрого определения реагиновых антител к кардиолипину, лецитину, холестерину в плазме или сыворотке крови человека при диагностике сифилиса

1. НАЗНАЧЕНИЕ

Набор реагентов «Люис RPR тест», далее по тексту – Набор, предназначен для диагностики сифилиса с использованием нетрепонемного теста. 2. ХАРАКТЕРИСТИКА НАБОРА2.1. Принцип действия

В «Люис RPR тест» диагностикум приготовлен на основе раствора холестерина, кардиолипина и лецитина, к которому добавлены частицы угля для облегчения визуального учета результатов. При взаимодействии антигена с реагиновыми антителами сыворотки образуются агрегаты черного цвета, видимые невооруженным глазом. В отсутствии реагиновых антител частицы угля остаются в мелкодисперсном состоянии.

^ 2.2. Состав набора

Ингредиент	Количество	Описание
Диагностикум	5 мл (два флакона)	Смесь кардиолипина, лецитина и холестерина с добавлением мелкодисперсных частиц угля. Суспензия черного цвета, при хранении разделяется на 2 фракции: верхнюю – прозрачную бесцветную жидкость, нижнюю – осадок черного цвета (взвесь частиц угля). Содержит консервант – азид натрия в концентрации 0,1%.
Положительный контрольный образец (К+)	1 мл (один флакон)	Сыворотка крови человека с клинически и серологически подтвержденным диагнозом сифилиса, содержащая реагиновые антитела к кардиолипину, лецитину, холестерину – инактивированная прозрачная жидкость, бесцветная или слегка желтоватого цвета. Содержит консервант - азид натрия в концентрации 0,1%.
Отрицательный контрольный образец (К-)	1 мл (один флакон)	Сыворотка крови человека, не содержащая реагиновые антитела к кардиолипину, лецитину, холестерину и к Treponema pallidum – инактивированная прозрачная жидкость, бесцветная или слегка желтоватого цвета. Содержит консервант – азид натрия в концентрации 0,1%.
Пластинки для реакции	50 шт (одна упаковка)	Карточки из ламинированного пластиком картона с 10-ю полями для постановки реакции с окрашенными окружностями, в пакете из полиэтилена.
Палочки для смешивания	500 шт (одна упаковка)	Деревянные, в пакете из полиэтилена.
Флакон для розлива	3 мл (одна штука)	Из прозрачного пластика в пакете из полиэтилена.
Игла для розлива (20 размер)	1 шт	В пакете из полиэтилена.

^ Набор рассчитан на проведение 500 определений. 3. МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ
● При работе с образцами сыворотки (или плазмы) крови пациентов следует обращаться как с потенциально инфекционными объектами, соблюдая меры предосторожности (СП 3.3.2.1288-03).

● Не разрешается модифицировать процедуру проведения анализа, сокращать продолжительность времени постановки реакции, использовать реагенты других производителей, а также реагенты других серий Набора «Люис RPR тест».

● Необходимо предусмотреть меры по предотвращению перекрестной контаминации реагентов.

● Компоненты «Люис RPR тест» содержат 0,1% азид натрия в качестве консерванта, который может быть токсичен при попадании внутрь.

^ 4. ОБОРУДОВАНИЕ И МАТЕРИАЛЫ, НЕОБХОДИМЫЕ ПРИ ПРОВЕДЕНИИ АНАЛИЗА

1. Полуавтоматические дозаторы со сменными наконечниками, с диапазоном дозирования жидкости 10-100 мкл, 100-1000 мкл;

2. Таймер;

3. Холодильник;

4. Перчатки латексные;

5. Миксер с орбитальным вращением SHAKER S3 или аналогичный орбитальный ротатор.

^ 5. АНАЛИЗИРУЕМЫЕ ОБРАЗЦЫ

В реакции могут быть использованы прогретые и непрогретые сыворотки или плазма крови пациента. Нельзя использовать образцы со следами бактериального пророста, гемолизированные или хилезные. Допускается хранение проб при температуре минус 20 °С в течение 4-6 недель.

^ 6. ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА

6.1. Подготовка растворов и реагентов

Все реагенты и пробы до начала проведения анализа выдержать 30 мин при температуре от 18 до 25 °С.

Перед употреблением хорошо взболтать суспензию диагностикума (флакон 1).

Приготовить систему для розлива диагностикума. Для этого снять крышку с пластикового флакона для розлива и плотно подсоединить иглу к его горлышку. Для заполнения системы сжать флакон и опустить конец иглы в суспензию диагностикума (флакон 1). Ослабить давление на пластиковый флакон, чтобы суспензия набралась внутрь. Возможно использование пипеточного дозатора со сменным наконечником.

ПРИМЕЧАНИЕ :

Хранение диагностикума в пластиковом флаконе сокращает срок его годности. Оставшуюся после тестирования суспензию перелить в исходный стеклянный флакон. После этого пластиковый флакон с иглой промыть дистиллированной водой и высушить на воздухе.

После вскрытия упаковки с пластинками для реакции хранить их только при температуре от 18 до 25 °С. Не прикасаться пальцами к кружкам.

^ 6.2. Проведение анализа

Качественный метод.

С помощью полуавтоматического дозатора нанести 50 мкл сыворотки или плазмы на кружок пластинки.

С помощью пластикового флакона для розлива с насаженной иглой (или полуавтоматическим дозатором) нанести на кружок 1 каплю (16 мкл) диагностикума рядом с каплей сыворотки, не смешивая.

С помощью палочки для смешивания соединить обе капли, равномерно распределив их по всей поверхности кружка.

Поместить пластинку на платформу орбитального ротатора и вращать в горизонтальной плоскости в течение 8 мин при скорости 100 об/мин.

ПРИМЕЧАНИЕ:

Каждая постановка должна обязательно включать реакцию с положительным (К+, флакон 2) и отрицательным (К-, флакон 3) контрольными образцами, входящими в состав набора. Реакция с контрольными образцами ставится аналогично вышеописанной схеме проведения качественного анализа.

^ Полуколичественный метод.

Реакция проводится с серийными разведениями (1:2 – 1:1024) тестируемого образца сыворотки в 0,9% растворе натрия хлорида (физиологическом растворе), осуществляемыми с помощью полуавтоматического дозатора:

Нанести по 50 мкл физиологического раствора на кружки для тестирования.

Добавить 50 мкл сыворотки или плазмы в кружок №1 и перемешать несколько раз с физиологическим раствором, набирая и выпуская сыворотку с помощью автоматического пипеточного дозатора.

Той же автоматической пипеткой-дозатором перенести 50 мкл в кружок №2 и повторить процедуру смешивания. Перенести 50 мкл в кружок №3.

Повторить ту же процедуру с кружками № 3-10, перенося по 50 мкл соответствующего разведения в следующий кружок. В результате должны получить тестируемые сыворотки в разведениях 1:2; 1:4; 1:8; 1:16; 1:32; 1:64; 1:128; 1:256; 1:512; 1:1024. Из последнего кружка удалить 50 мкл.

С помощью пластикового флакона для розлива с насаженной иглой нанести на каждый кружок 1 каплю (16 мкл) диагностикума рядом с каждой каплей разведенной сыворотки, не смешивая.

С помощью палочки для смешивания смешать обе капли, распределив их по всей поверхности каждого кружка (от большего разведения к меньшему).

Поместить пластинку на платформу орбитального ротатора и вращать в горизонтальной плоскости 8 мин при скорости 100 об/мин.

Немедленно произвести учет результатов (не допускать высыхания).

^ 7. РЕГИСТРАЦИЯ И ИНТЕРПРЕТАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ

7.1. Интерпретация результатов при качественном анализе:

Учет результатов проводится визуально при хорошем освещении:

ПОЛОЖИТЕЛЬНАЯ РЕАКЦИЯ - Наличие средних и больших

Агрегатов при просветлении

Реакционной среды

СЛАБАЯ РЕАКЦИЯ - Образование редких

Небольших агрегатов

ОТРИЦАТЕЛЬНАЯ РЕАКЦИЯ - Видимые агрегаты отсутствуют,

Наблюдается равномерное

Распределение частиц

Равномерного серого цвета

Реакция К+ в присутствии - Средние и большие агрегаты

диагностикума

Реакция К- в присутствии - Видимые агрегаты отсутствуют,

Диагностикума наблюдается равномерное

Распределение частиц

^ 7.2. Интерпретация результатов при полуколичественном анализе:

Учет результатов производят визуально при хорошем освещении, как описано для качественного анализа. Титром образца следует считать последнее разведение, в котором определяется слабоположительный результат. Титр К+ в присутствии диагностикума ≥ 1:2. Титр К- в присутствии диагностикума отсутствует.

ПРИМЕЧАНИЕ :

Следует иметь в виду, что при использовании «Люис RPR тест» иногда наблюдаются ложноположительные реакции у больных с другими заболеваниями. Поэтому любой положительный результат должен быть проконтролирован с помощью метода, использующего специфический трепонемный антиген, например «Люис РПГА тест» (производства ООО «НИАРМЕДИК ПЛЮС»), либо других специфических наборов реагентов.

Цена: по запросу

Вы можете добавить товар в корзину, указав количество

Производитель: Ниармедик

Страна: Россия

Ед. изм.: упаковка

Вид упаковки: картонная коробка

Артикул: 7-02-4

Описание

Набор реагентов Люис RPR тест для определения реагиновых антител к кардиолипину, лецитину, холестерину в плазме или сыворотке крови человека при диагностике сифилиса Люис RPR (Rapid Plasma Reagin – антикардиолипиновый) тест-система для первичного скрининга и оценки эффективности лечения сифилиса в быстром плазмореагиновом тесте Рассчитана на проведение 500 исследований, включая контрольные образцы

Функциональное назначение

Качественное и количественное определение при обследовании доноров, профилактическое и первичное обследование при подозрении на сифилис, диагностика скрытого сифилиса, контроль эффективности лечения (снижение титра в 4 и более раз).
Быстрый плазмареагиновый тест (аналог микрореакции) - флоккуляционный тест на наличие антител к кардиолипину/ холестерину/ лецитину (сорбированных на мелкодисперсных частицах угля для улучшения визуализации преципитата).
Получение результата в течение 8 минут.
Для проведения анализа достаточно 50 мкл непрогретой плазмы или сыворотки крови из пальца.
Наиболее чувствительная из нетрепонемных тест-систем. Снижает вероятность феномена прозоны с высокотитражными сыворотками.
Готовые к употреблению высокостабильные реагенты, включая контрольные сыворотки и устройство для дозированного раскапывания. Постановка на одноразовых планшетах с 18-мм лунками, удобство раститровки и количественной постановки.

Технические характеристики

*Назначение диагностического теста - Скрининг и оценка эффективности лечения сифилиса.
Принцип исследования - Нетрепонемный флоккуляционный тест.
Определяемый показатель - Реагиновые антитела при скрининговой диагностике сифилиса.
Контрастирующее вещество для облегчения визуального учета - мелкодисперсный уголь - обязательно.
Количество определений - не менее 500 (пластинки для реакции не менее 50х10 определений)
Срок годности - не менее 18 месяцев с даты производства.
Остаточный срок годности при поставке - не менее 15 месяцев.
Срок годности компонентов после вскрытия флаконов - не менее 2 месяцев.
Время анализа — не более 8 минут.
Температура проведения анализа — комнатная.
Подготовка компонентов - Готовые к употреблению компоненты, включая контрольные сыворотки.
Флаконы-дозаторы для раскапывания антигена должны входить в комплектацию тест-системы - обязательно.
Наличие регистрационного удостоверения МЗ РФ (№ ФСР 2008/03715).
Набор полностью соответствует требованиям ТУ 9398-006-40371634-2008.
Состав набора (в упаковке — не менее 500 тестов):
1. Тест эритроциты - 2фл.х5 мл, суспензия красно-коричневого цвета при хранении разделяется на две фракции.
2. Контроль положительный (К +) - 1 мл, прозрачная жидкость желтоватого цвета, во флаконах-капельницах.
3. Контроль отрицательный (К -) - 1 мл, прозрачная жидкость желтоватого цвета, во флаконах-капельницах.
4. Пластинки для реакции - 50 шт.
5. Флакон для розлива - 3 мл.
6. Игла для розлива реагента 20го размера.
7. Палочки для смешивания - 500 шт.
Объем реакционной смеси - 100 мкл.
Стабильность результатов в течение 12 часов

Анализ на сифилис делают, применяя множество методик обнаружения возбудителя. При развитии патологии проявляется большое количество специфических признаков, поэтому с целью установления точного диагноза больного человека обследуют комплексно. Общий анализ крови при этом малоинформативен, его не используют при диагностировании данной венерической инфекции.

Виды исследований и биоматериалов для анализа

Для выявления болезни используют различные методики и биоматериалы. На ранних этапах сифилис определяют с помощью бактериоскопического теста. Образцы исследуют под микроскопом. Прибор позволяет обнаружить штаммы возбудителя. Позднее проводят серологические анализы крови. Благодаря им, в пробах выявляют антигены и антитела сифилиса.

Способы определения половой инфекции поделены на 2 категории:

• Прямые, выявляющие патогенный микроорганизм. К ним относят: темнопольная микроскопия, RIT-анализ (инфицирование кроликов биоматериалом для исследования), метод ПЦР – полимеразной цепной реакции (с его помощью находят генетические элементы возбудителя).
• Непрямые (серологические) позволяют обнаружить антитела к патогену. Они продуцируются иммунной системой, как ответная реакция на заражение.

Серологические методики поделены на 2 категории: трепонемные и нетрепонемные.

• Нетрепонемные, включающие: тест с толуидиновым красным, анализ РСК, RPR- тест, исследование крови экспресс-методом РМП.
• Трепонемные, включающие: иммуноблоттинг, РСК-тест, РИТ-анализ, исследование РИФ, РПГА-тест, ИФА-анализ.

Информативность тестов на инфекцию различна. Чаще делают основные виды анализов на сифилис, к которым отнесены серологические методики.

Биоматериал для исследования

Чтобы выявить бледную трепонему – патогена, который выглядит, как спираль и вызывает сифилис, берут пробы:

• венозной крови;
• ликвора (секрета из спинномозгового канала);
• содержимое лимфатических узлов;
• ткани изъязвлений.

Если необходимо провести тесты на обнаружение сифилиса, кровь сдают не только из локтевой вены, но и из пальца. На выбор биоматериала и способ исследования влияет тяжесть течения инфекции и оснащенность диагностического центра.

Прямые исследования

Убедительным доказательством сифилиса является выявление возбудителей инфекции под микроскопом. Таким способом находят патоген у 8 обследуемых из 10. Отрицательный результат у 2 оставшихся пациентов не говорит о том, что они не инфицированы.

Исследование делают на первичном и вторичном этапе (стадии) заболевания, для которых характерно появление высыпаний на коже и сифилом (изъязвлений) на эпителиальных тканях или слизистых оболочках. В отделяемом из очагов поражения находят патогены, вызывающие венерическое заболевание.

Точнее с определением трепонем справляется сложный тест, обозначающийся как РИФ – реакция иммунофлуоресценции. Образец для исследования предварительно обрабатывают флуоресцентными антителами. Соединения, способные светиться, склеиваются с бактериями. Рассматривая под микроскопом образцы, в случае заражения лаборант видит сверкающих возбудителей.

Тест используют для раннего диагностирования болезни. Чем дольше длится заболевание, тем ниже чувствительность исследовательских способов. Кроме того, она падает после обрабатывания высыпаний и язв антисептическими средствами и у пациентов, прошедших лечение. Изредка исследование дает ложноотрицательные и ложноположительные результаты.

RIT-анализ – высокоточный способ обнаружения сифилиса. При проведении теста результаты приходится ждать долго. До тех пор, пока у инфицированного кролика не проявятся признаки инфекции. Тест применяют очень редко, несмотря на то, что он сверхточен.

С помощью полимеразной цепной реакции на сифилис определяют генетические элементы патогенов. Единственный недостаток ПЦР – дороговизна.

Нетрепонемные тесты

Такие анализы крови помогают выявить антитела, появляющиеся в ответ на кардиолипин – соединение, относящееся к общему строению мембран патогенов.

Реакция Вассермана (РВ или RW)

Самым известным исследованием на сифилис считается реакция Вассермана. РВ входит в категорию реакций связывания комплемента (РСК). Новые методы РСК обладают существенными отличиями от традиционной RW. Но обозначаются они, как и раньше понятием «реакция Вассермана».

Иммунная система, синтезирует антитела (маркеры) в ответ на вторжение трепонем. Их выявляют при анализе крови на сифилис методом реакции Вассермана. Положительный результат RW подтверждает инфицирование обследуемого.

Реакция гемолиза – индекс РВ анализа. При ней взаимодействуют 2 субстанции: гемолитическая сыворотка и эритроциты барана. Сыворотку делают, иммунизируя кролика эритроцитами барана. Активность биологической жидкости снижают путем прогревания.

Показатели РВ зависят от того, прошел гемолиз или нет. В пробе чистой от маркеров происходит гемолиз. При этом реакция на антигены невозможна. Комплемент тратится на взаимодействие с бараньими эритроцитами. Когда в образце есть маркеры, комплимент вступает в реакцию с антигенами. В этом случает гемолиз не протекает.

Читайте также по теме

Как при сифилисе выглядит твердый шанкр?

Компоненты для RW отмеряют в равном количестве. Образец, содержащий сыворотку, антиген и комплимент, прогревают. Добавляют в пробу бараньи эритроциты и сыворотку. Держат при температуре 37 градусов, пока не наступит гемолиз в контрольном образце, который вместо антигена содержит физраствор.

Для проведения РВ используют готовые антигены. На упаковках указывают титры и технологию их разбавления. Позитивный результат RW обозначается крестиками. Готовые результаты тестов обозначаются следующим образом:

• ++++ – максимально позитивные (гемолиз задержался);
• +++ – положительные (гемолиз существенно запаздывает);
• ++ – слабо позитивные (гемолиз частично промедлил);
• + – сомнительные (гемолиз припозднился незначительно).

При отрицательной РВ гемолиз полностью осуществился во всех образцах. Но в некоторых случаях получают ложноположительные данные. Такое происходит, когда кардиолипин входит в состав клеток. Защитные механизмы не продуцируют маркеры к «родному» кардиолипину.

Однако изредка возникают исключительные ситуации. Положительную RW выявляют у незараженных людей. Такое возможно, если пациент перенес тяжелую болезнь, вызванную вирусами (пневмонию, малярию, туберкулез, патологии печени и крови). Положительной РВ бывает у беременных. Обусловлено это тем, что иммунитет чрезмерно ослаблен.

Если возникает подозрение, что результат анализа на сифилис ложноположительный, пациента обследуют дополнительно. Проблема в том, что эту инфекцию невозможно выявить по единственному клинико-лабораторному тесту. Часть исследований дает ложные показатели, которые бывают как отрицательными, так и положительными.

Получить достоверные данные помогает развернутый анализ на сифилис. Благодаря ему устанавливают истинный диагноз: доказывают заражение или исключают его. Кроме этого, расширенный тест позволяет остановить развитие инфекции, исключить проведение ненужной терапии.

РСК и РМП

Проводя обследование на сифилис, традиционную реакцию Вассермана применяют крайне редко. Вместо нее используют метод РСК. Анализ дает положительный результат спустя 2 месяца после инфицирования. При вторичной форме заболевания он положителен почти в 100% случаев.

Способ микропреципитации (РМП) – исследование с механизмом аналогичным реакции Вассермана. Методика проста в исполнении. Она быстро проводится. Для исследования кровь на сифилис в этом случае сдают из пальца. Методика дает положительный результат через 30 дней с момента появления сифилом. Ошибки при исследовании не исключены. Ложноположительные данные получают на фоне: обострившихся инфекций, пневмонии, инфаркта, инсульта, интоксикации.

К ошибочным тестам приводит:

• туберкулез;
• болезнь Бенье́-Бека-Ша́умана;
• ревматоидные заболевания;
• диабет;
• цирроз;
• бруцеллез;
• лептоспироз;
• мононуклеоз.

Обнаружив сомнительный анализ на сифилис, делают трепонемные исследования. Они помогают уточнить диагноз.

RPR и тест с толуидиновым красным

Метод плазменных реагинов (RPR) – очередной аналог реакции Вассермана. Его применяют, когда необходимо:

• провести скрининг бессимптомных лиц;
• подтвердить сифилис;
• исследовать донорскую кровь.

Тест с толуидиновым красным, как и RPR, проводят, чтобы оценить динамику лекарственной терапии. Их показатели падают при отступлении болезни, и увеличиваются, когда патология рецидивирует.

Трепонемные исследования

Высоко результативные анализы проводят, используя трепонемные антигены. Их делают, когда:

• получен положительный результат при методе РМП;
• необходимо распознать ошибочные данные, возникающие при скрининговых тестах;
• подозревают развитие сифилиса;
• нужно диагностировать скрытно текущую инфекцию;
• надо провести ретроспективную диагностику.

Тесты РИФ и РИТ

У множества пролеченных больных трепонемные исследования проб дают положительные результаты долгое время. По ним нельзя судить о степени эффективности лечения. РИТ и РИФ – сверхчувствительные тесты. Благодаря им получают достоверные данные. Эти анализы трудоемки, они требуют приличных временных затрат, наличия прогрессивного оборудования. Их способны проводить квалифицированные медработники.

Выполняя РИФ анализ на сифилис, положительные данные получают спустя 2 месяца после инфицирования. Отрицательные параметры подтверждают, что обследуемый здоров. Положительные – позволяют предположить, что человек инфицирован.

РИТ проводят, когда реакция микропреципитации положительна. Такой анализ крови на сифилис помогает опровергнуть или удостоверить наличие инфекции. Тест сверхчувствителен, он точно указывает заражен пациент или здоров. Но исследование дает достоверные данные только через 3 месяца после проникновения трепонем в организм.

Метод иммуноблоттинга

К сверхточным тестам относят иммуноблоттинг. Такой анализ крови при сифилисе делают редко. Его применяют при обследовании новорожденных детей. Он не пригоден для экспресс-тестирования. Положительные результаты получают с опозданием. Их гораздо раньше дает метод микропреципитации.

Читайте также по теме

Что обозначают кресты в анализе на сифилис, что делать, если их 4?

ИФА и РПГА

К информативным сверхточным методам исследования относят тесты ИФА и РПГА. С их помощью проводят экспресс-диагностирование. Лаборанты делают огромное количество таких анализов. Благодаря им удается установить точный диагноз.

РПГА анализ на сифилис положителен через 30 дней после проникновения возбудителя в организм. С его помощью диагностируют первичную инфекцию, когда появляются язвы и сыпь. Благодаря ему удается выявить запущенные, скрытно текущие, а также врожденные формы патологии. Но проводят его совместно с нетрепонемными и трепонемными тестами. Комплексное диагностирование гарантирует достоверность результатов. Тройное тестирование точно доказывает наличие или отсутствие венерической инфекции.

ИФА анализ положителен спустя 21 день с момента заражения. Тест иногда дает ошибочные результаты. Они появляются при системных патологиях, нарушенных обменных процессах. Их результативность сомнительна у ребенка, родившегося от инфицированной матери.

Погрешности, получаемые при серологических способах исследования, стали причиной открытия прогрессивных методик диагностики. Газовая хроматография и масс-спектрометрия не дают ложных результатов. Единственное препятствие для их массового использования – дороговизна.

Алгоритм диагностирования

• При нахождении сифилиса в первичной фазе (до 60 дней с момента инфицирования), возбудителя отыскивают на темном фоне или используют для их обнаружения флюоресцирующие антитела.
• Если патология находится в первичной, вторичной или скрытой форме применяют РМП и ИФА. Подтвердить результаты помогает РПГА анализ крови на сифилис.
• При рецидивах вторичной инфекции анализируют отделяемое изъязвлений и высыпаний. Из образцов извлекают возбудителей, изучают их с помощью микроскопии.
• Когда заболевание входит в третичную фазу, у 1/3 пациентов РМП отрицательная. При этом результаты ИФА и РПГА положительны. Однако они не всегда указывают на третичный период, а подтверждают, что человек раньше перенес инфекцию. Слабоположительный тест – доказательство полного излечения, а не развития третичной фазы.
• Подтверждая врожденный сифилис , анализ крови берут у матери и младенца. Сравнивают данные тестов РМП. Учитывают то, что у малыша ИФА и РПГА положительны. Подтверждают диагноз, используя методику иммуноблоттинга.

Сифилис, как любая системная патология, поражает весь организм. Поэтому обследование на него проходят при беременности, перед абортом. Пациенткам делают РМП, ИФА, РПГА.

Как сдать анализ

Отправляет пациентов на анализ врач-венеролог. Частные лаборатории делают анонимные исследования на сифилис по желанию клиента. Для сдачи теста в них не нужно направление врача.

Правила проведения исследования:

• Кровь в лаборатории берут утром на пустой желудок (едят после процедуры). До анализа разрешено пить только воду.
• За 2 суток до обследования запрещено: питаться жирной едой и употреблять спиртное.
• Кровь берут из пальца или вены.
• Сколько длится исследование? Обычно не больше суток. Расшифровку анализов на сифилис получают у лаборантов либо лечащего врача.
• Сколько действителен тест? По прошествии 3 месяцев результаты анализов теряют силу. Их сдают снова.

Если расшифровка анализа показывает, что тест положителен, необходимо посетить венеролога, который назначит дополнительное обследование для точного подтверждения диагноза и подберет схему необходимого лечения.

Тестирование спинномозгового содержимого

Диагноз нейросифилис ставят после того, как исследуют ликвор. Такой анализ делают:

• людям со скрытой формой инфекции;
• при симптомах заболеваний нервной системы;
• бессимптомном, запущенном нейросифилисе;
• выздоровевшим больным с положительными серологическими реакциями.

Направление на исследование ликвора дает врач. Из спинномозгового канала берут пункцию в 2 пробирки. Прокол смазывают йодом, закрывают стерильной салфеткой. После процедуры пациент соблюдает постельный режим на протяжении 2 дней.

В 1 образце определяют количество белка, клеток, следы менингита. Во второй пробе вычисляют антитела к возбудителю сифилиса. Для этого делают тесты: РВ, РМП, РИФ и РИБТ.

В зависимости от того сколько выявлено нарушений, различают 4 разновидности ликвора. Каждая указывает на определенные повреждения нервной системы. Врач диагностирует:

• сосудистый нейросифилис;
• сифилитический менингит;
• спинную сухотку и прочее.

Помимо того, по результатам тестов судят о выздоровлении пациента.

Интерпретация тестов – задача врача. Только он способен сделать правильные выводы, при необходимости назначить дополнительное обследование, поставить точный диагноз. Не стоит делать самостоятельную диагностику при опасной системной патологии. Ошибка в диагнозе влечет за собой серьезные последствия.

Исследование крови на сифилис RPR (rapid plasma reagin) назначается пациентам для первичной диагностики венерического заболевания, а также для оценки эффективности терапии. Этот анализ является неспецифическим и проявляет большую чувствительность к обнаружению инфекции на остром этапе ее развития. Тест РПР - более современный аналог реакции Вассермана. Он выявляет антитела к липоидным компонентам, высвобождаемым при повреждении клеток организма бледными трепонамами. Инфекция, попавшая через кожу или слизистые оболочки, со временем поражает внутренние органы, костную и нервную систему. Запущенный сифилис приводит к полной инвалидизации больного.

Когда нужно сдать PRP анализ на сифилис

Анализ на сифилис RPR проводится в следующих случаях:

Во время осуществления обследования при подозрении на трепонемную инфекцию. Показаниями могут быть имеющиеся признаки заболевания у пациента, наличие бытовых или половых контактов с зараженным человеком.

Во время диагностики, назначаемой для обнаружения латентных форм сифилиса. Инфекция может длительное время не проявлять себя никакими симптомами.

При обследовании людей, желающих стать донорами крови.

При скрининге беременных. Анализы на сифилис женщины должны сдать после постановки на учет и в третьем триместре. Заболевание опасно для плода, и при его инфицировании возможны преждевременные роды и врожденные патологии.

Антикардиолипиновый вид антител выявляют с помощью теста RPR у 70% больных, имеющих первичную форму заболевания.

При вторичной стадии сифилиса положительная микрореакция наблюдается у 98% инфицированных.

На этом этапе развиваются кожные проявления в виде твердых шанкров, представляющих округлые образования с плоским красным уплотненным дном и неровными краями. Они являются источниками заражения здоровых людей при половых или бытовых контактах.

При скрытой форме сифилиса у больных язвы и шанкры не развиваются. Многие исследования, в том числе и методом RPR, могут не выявлять наличие инфекции на первоначальном этапе.

Как подготовиться к обследованию на сифилис PRP методом

Для того чтобы анализы показали достоверные результаты, врачи рекомендуют придерживаться определенных правил, несоблюдение которых может привести к искажению данных.

Перед процедурой забора крови не разрешается употреблять пищу. Промежуток между взятием биологического материала и едой должен составлять восемь часов. При этом желательно воздержаться от употребления продуктов с высоким содержанием жиров. Алкогольные напитки накануне проведения анализа пить запрещено. Для того чтобы реакция прошла качественно и показала достоверные результаты, врачи рекомендуют отказаться от курения за час перед забором крови.

При назначении исследования необходимо сообщить врачу о недавно проведенной флюорографии, ультразвуковой диагностике, физиолечении, рентгенографии. Перед тем как сдавать кровь, допускается пить только чистую воду. Кофеинсодержащие напитки, в том числе зеленый и черный чаи, употреблять не разрешается.

Эмоциональная перегрузка и физические тренировки могут отрицательно сказаться на результатах исследования, поэтому за два часа до посещения лаборатории не нужно заниматься спортом, волноваться.

Расшифровка результатов - нормы и отклонения

Сифилитический анализ RPR считается качественным. На бланке лаборатории результат отмечается словом «отрицательно» при отсутствии в крови антикардиолипиновых антител. При их выявлении ставится – «положительно». Если титры низкие, на бланке лаборанты отмечают результат словом «сомнительно». В этом случае врачи-венерологи рекомендуют пройти исследование повторно через 1,5-2 недели.

Отрицательный ответ выдается, если:

• у пациента отсутствует инфицирование сифилисом;
• заражение произошло недавно, и антитела еще не появились;
• у больного запущенная стадия венерического заболевания.

RTR-тесты дают положительный ответ в следующих случаях:

Сифилис имеет первичную форму, и инфицирование произошло не более 90 дней назад.

Заболевание находится на втором этапе.

Период после успешно проведенной терапии трепонемной инфекции. На протяжении года лабораторные исследования могут выявлять антитела.

Анализы могут быть ложноположительными при определенных заболеваниях:

• сахарном диабете;
• подагре;
• туберкулезе;
• малярии;
• аутоиммунных процессах, повреждающих соединительную ткань.

У беременных женщин, а также лиц, страдающих наркоманией, антикардиолипиновые тесты иногда дают положительные результаты. В этом случае врач-венеролог выписывает повторное направление на исследование, которое рекомендуется проходить через 14 дней после первой сдачи крови.

При получении отрицательного результата анализа RPR и наличии у пациента определенных признаков инфекционного заболевания венеролог может назначить дополнительные исследования.

Основанием для подозрения инфицирования являются высыпания на кожных покровах, слизистых оболочках, воспаленные регионарные лимфатические узлы. При возникновении подобных симптомов врач выдает направление на анализы крови РПГА и ИФА. Эти методы считаются более чувствительными по сравнению с RPR.

Цена вопроса

Стоимость нетрепонемного теста RPR в среднем составляет 6,5$ без учета процедуры забора крови. Цена на взятие биологического материала в частных лабораториях составляет около 3,5$.

Срок исполнения анализа RPR в платных учреждениях - 1 рабочий день. При необходимости и своевременной сдаче крови согласно расписанию результаты пациент может получить уже через 2 часа.

В кожно-венерологических диспансерах (по России) и государственных поликлиниках анализы осуществляются бесплатно. Срок выполнения зависит от загруженности лабораторий. Анализ действителен три месяца.

Где сдать анализ

Анализ на сифилис можно сдать в любых платных диагностических центрах. В Инвитро исследования крови на сифилис проводятся как с помощью неспецифических тестов (RPR, RW), так и с использованием трепонемных методов. В отделениях этого центра общая стоимость анализа составляет около 10$.

Антикардиолипиновые тесты проводятся также лабораторной службой Хеликс. Цена на RPR-анализ составляет здесь 8,9$, включая стоимость процедуры взятия биоматериала. В центре Гемотест цена исследования - 6,3$. Забор крови стоит 3,5$. Срок проведения анализа - одни сутки, не считая день сдачи биоматериала.

Свои услуги по проведению анализа на сифилис RPR предлагает CMD (центр молекулярной диагностики). Общая стоимость с включением забора крови - 9,1$.

Анализы крови на сифилис методом RPR назначаются врачами пациентам, имеющим признаки венерического заболевания или проходящим общее обследование. Для получения точных результатов пациенты должны соблюдать ряд правил, о которых предварительно уведомит врач. Следует сообщить специалисту, если накануне проводились исследования, курсы лекарственной терапии. При выявлении инфекции больному назначаются антибактериальные препараты и поддерживающие иммунную систему средства.

Ничего не сказала доктор про ребенка, надо ли его обследовать? Мог ли ребенок получить инфекцию внутриутробно?

И еще вопрос, глупый, наверное, но не с кем посоветоваться, проконсультироваться (в городе 1 врач-сифилидолог), я сейчас представляю угрозу для близких - мужа, ребенка? Заразна ли я?

У меня теперь всю жизнь будет положительный анализ? Пожалуйста, ответьте, не могу ни есть, ни спать, ни работать. Муж тоже переживает сильно за нас, за ребенка.

Dr.Agapov 10 Июль:14mimi 10 Июль:01

Три варианта - либо это серорезистентный сифилис,либо ложноположительный нетрепонемный тест (РМП) при перенесенном ранее сифилисе,либо новое заражение сифилисом при перенесенном ранее сифилисе.

Как отдельный вариант - наличие спирохеты в спинномозговых оболочках (нейросифилис).Это встречается в тех случаях когда лечение вторичного и скрытого сифилиса проводили дюрантными препаратами пенициллина (ретарпен,экстенциллин,бициллин),которые не проникают через гематоэнцефалический барьер.

Лечение цефтриаксоном я уже начала.

Про нейросифилис страшно даже читать. А можно вкратце, как он проявляется? Я конечно же не помню, какими препаратами лечилась ранее. А к невропатологу должен врач направить меня? Наверное, это будет целесообразным после курса лечения сделать и после того, как сдам анализы, да? Или уже сейчас надо идти?

Еще один вопрос - во время лечения следует ли сохранять половой покой? Извините за глупые вопросы, я так была ошарашена результатами анализов, что не спросила у доктора, а она сама об этом не сказала ничего.

Dr.Agapov 11 Июль:11

Пациенты с серорезистентностью не заразны,но лучше половые контакты прекратить - так как ситуация с Вами полностью неясна.

mimi 11 Июль:37

Информация заставляет задуматься.

Буду ждать направления врача, хотя на прием к нему иду только 25.07 после окончания лечения.

Полная интерпретация анализов на сифилисАнализы на сифилис: виды анализов, расшифровка результатов, причины ложноположительных и ложноотрицательных результатов обследования.

Сифилис – это венерическое заболевание, возбудителем которого является бактерия Treponema pallidum (бледная трепонема). Подробнее о путях передачи сифилиса, его симптомах и возможных осложнениях читайте в статье Все о сифилисе. Симптомы и лечение.

Своевременное выявление сифилиса (с помощью специальных анализов) позволяет врачам вовремя начать лечение и предотвратить развитие опасных осложнений этой болезни.

Проведение анализов на сифилис во время беременности помогает предотвратить рождение детей с врожденным сифилисом. Подробно об анализах на сифилис во время беременности рассказано в статье Все о диагностике и лечении сифилиса во время беременности.

Почему мне назначили анализ на сифилис?

В подавляющем большинстве случаев у врачей нет возможности получить точные данные о сексуальной жизни пациентов (некоторые люди скрывают детали своей половой жизни или недооценивают риск заражения заболеваниями передающимися половым путем). В связи с этим, для того чтобы защитить людей от возможных последствий их собственной невнимательности или недостатка медицинских знаний, в некоторых случаях врачи назначают так называемые скрининговые анализы на сифилис (то есть анализы, которые сдают большие количества людей).

Врач может назначить вам анализы на сифилис, даже если у вас нет симптомов этой болезни, и вы уверены, что не могли им заразиться.

Необходимость проведения этих анализов связана с тем, что сифилис иногда передается бытовым путем (не через сексуальный контакт) и протекает в скрытой форме (то есть без симптомов).

Как правило, скрининговое обследование назначается в следующих ситуациях:

При устройстве на работу (работникам здравоохранения, общественного питания, военнослужащим и пр.)

При становлении на учет по поводу беременности.

Во время поступления в больницу, при подготовке к операциям.

Донорам крови.

Лицам, заключенным в местах лишения свободы.

Врач также может назначить анализы на сифилис:

При обнаружении симптомов заболевания (обычно, это сыпь в области половых органов).

При получении положительных результатов скрининговых анализов на сифилис.

В случае если у вас был половой контакт с человеком, у которого был выявлен сифилис.

Новорожденным детям, матери которых больны сифилисом.

Кроме того, анализы на сифилис периодически проводятся во время лечения (для того, чтобы убедиться в том, что лечение эффективно) и даже после окончания курса лечения, для контроля излеченности.

Какие анализы используются в диагностике сифилиса?

Диагностикой и лечением сифилиса занимается врач дерматовенеролог. В диагностике заболевания могут быть использованы следующие анализы:

Осмотр кожи, наружных и внутренних половых органов производится с целью выявления основных симптомов сифилиса: твердый шанкр, увеличение лимфатических узлов, высыпания на коже и пр. (см. Симптомы сифилиса)

Для того чтобы обнаружить бледную трепонему, врачи обследуют под микроскопом мазки (или соскобы), полученные из язв, лимфатических узлов, околоплодных вод у беременных и пр. Кровь под микроскопом не обследуют.

Важно: Если в ваших анализах под микроскопом была обнаружена бледная трепонема, это означает, что вы точно больны сифилисом. Но если анализы показали, что возбудитель сифилиса не обнаружен, нельзя быть полностью уверенным в том, что сифилиса нет. Для того чтобы убедиться, что вы не больны, нужно сдать дополнительные анализы, описанные ниже.

ПЦР (полимеразная цепная реакция) – это сложный и дорогостоящий метод диагностики сифилиса, который позволяет обнаружить ДНК бледной трепонемы в крови или других исследуемых материалах (околоплодные воды, спинномозговая жидкость). Если анализ ПЦР дал отрицательный результат, то, скорее всего, вы не больны сифилисом. Однако при получении положительного результата (то есть, если ПЦР обнаружил ДНК бледной трепонемы в крови), нет 100% гарантии, что вы больны. Это связано с тем, что ПЦР иногда дает ложноположительные результаты (дает положительный результат при отсутствии заболевания). Поэтому если ПЦР дал положительный результат, рекомендуется дополнительно пройти другие методы обследования на сифилис (например, реакцию иммунофлюоресценции (РИФ) и реакцию пассивной гемагглютинации (РПГА)).

Что такое серологический анализ на сифилис?

Серологический анализ – это обнаружение в крови особых белков (антител), которые вырабатываются в организме человека в ответ на инфекцию. В отличие от предыдущих методов диагностики, серологические анализы обнаруживают не саму бледную трепонему, а лишь ее «следы» в организме.

Если в вашей крови обнаружены антитела к бледной трепонеме, это говорит о том, что вы либо заражены сифилисом в данный момент, либо переболели им ранее.

Какие анализы указывают на то, что человек болен сифилисом?

Серологические анализы на сифилис делятся на 2 большие группы: неспецифические и специфические тесты. Основное различие этих анализов заключается в том, что неспецифические тесты показывают положительный результат только если человек болен сифилисом в данный момент и становятся отрицательными после излечения, а специфические тесты остаются положительными даже после излечения заболевания.

Говоря другими словами, отрицательный результат неспецифического теста является некоторой гарантией того, что вы здоровы.

Какие анализы на сифилис являются неспецифическими (нетрепонемными)?

К неспецифическим анализам относят микрореакцию преципитации (МР) и реакцию Вассермана (РВ, RW). Эти тесты используются для скрининга на сифилис. После излечения сифилиса эти анализы становятся отрицательными у 90% людей.

Как работают эти тесты: в результате жизнедеятельности бледной трепонемы (при сифилисе) в организме погибают клетки. В ответ на разрушение клеток иммунная система вырабатывает особые белки (антитела, или иммуноглобулины). Неспецифические тесты направлены на выявление этих антител, а также подсчет их концентрации (определение титра антител).

Микрореакция преципитации (МР) и ее аналоги в некоторых странах: тест быстрых реагинов (RPR, Rapid Plasma Reagins) и тест VDRL (Venereal Diseases Research Laboratory) - это нетрепонемные тесты, которые назначаются при скрининге на сифилис.

Через какое время после заражения анализ становится положительным: как правило, через 4-5 недель после заражения.

Как оценивать результаты анализа: если анализ показал положительный результат, то есть вероятность, что вы больны сифилисом. Так как этот анализ может ошибочно давать положительные результаты, рекомендуется пройти дополнительное обследование с помощью специфических тестов, описанных ниже. Отрицательный результат указывает на отсутствие сифилиса, либо раннюю стадию заболевания (до появления антител в крови).

Как оценивать полученный титр антител: если в крови обнаружены антитела в титре от 1:2 до 1:320 и выше, это означает, что вы заражены сифилисом. При позднем сифилисе титр антител может быть низким (что оценивается как сомнительный результат).

Какие могут быть причины ложноположительных результатов: ложноположительные результаты МР встречаются примерно в 2-5% случаев, вот их возможные причины:

Системные заболевания соединительной ткани (системная красная волчанка, склеродермия, ревматоидный артрит, дерматомиозит, васкулиты и пр.)

Инфекционные заболевания: вирусные гепатиты, инфекционный мононуклеоз, туберкулез, некоторые кишечные инфекции и пр.

Воспалительные заболевания сердца (эндокардит, миокардит).

Сахарный диабет.

Беременность.

Недавно проведенная вакцинация (прививание).

Употребление алкоголя, наркотиков и др.

Перенесенный ранее и излеченный сифилис (примерно у 10% людей, прошедших курс лечения, анализ МР может оставаться положительным всю жизнь).

Какие могут быть причины ложноотрицательных результатов: анализ может ошибочно показать отрицательный результат, если в крови содержится много антител, если анализ взят на ранней стадии заболевания до появления антител, либо при позднем сифилисе, когда в крови остается мало антител.

Реакция Вассермана (РВ, RW) - это нетрепонемный тест, который используется для скрининга на сифилис в странах СНГ.

Что обследуют: кровь (из пальца или из вены), спинномозговую жидкость.

Через какое время после заражения анализ становится положительным: как правило, через 6-8 недель после заражения.

Как оценивать результаты анализа: «-» - отрицательная реакция, «+» или «++» это слабоположительная реакция, «+++» это положительная реакция, «++++» это резко положительная реакция. Если реакция Вассермана показала хотя бы один плюс, то вам необходимо сдать дополнительные анализы на сифилис. Отрицательная реакция не является гарантией того, что вы здоровы.

Как оценивать полученный титр антител: титр антител от 1:2 до 1:800 говорит о наличии сифилиса.

Какие могут быть причины ложноположительных результатов: реакция Вассермана может ошибочно дать положительный результат по тем же причинам, что и микрореакция преципитации (МР), а также, если незадолго до сдачи крови на анализ вы пили алкоголь или употребляли жирную пищу.

В связи с большим количеством ошибочных результатов Реакция Вассермана (РВ, RW) используется все реже и заменяется другими, более достоверными методами диагностики.

Неспецифические тесты (микрореакция преципитации (МР) и реакция Вассермана (РВ, RW)) являются хорошими методами диагностики сифилиса. Отрицательный результат обследования с большой вероятностью указывает на то, что вы здоровы. Но при получении положительных результатов этих анализов необходимо дополнительное обследование с помощью специфических (трепонемных) тестов.

Какие анализы на сифилис являются специфическими (трепонемными)?

К трепонемным тестам относят следующие анализы: реакция иммунофлюоресценции (РИФ), иммуноблотинг, реакция пассивной агглютинации (РПГА), реакция иммобилизации бледных трепонем (РИБТ), иммуноферментный анализ (ИФА).

Специфические тесты назначают людям, у которых выявлены положительные результаты микрореакции преципитации (МР) или реакции Вассермана (РВ). Специфические тесты остаются положительными еще долгое время после излечения сифилиса.

Как работают эти тесты: при попадании в организм возбудителей сифилиса иммунная система вырабатывает антитела, направленные на борьбу с бледной трепонемой. Эти антитела появляются в крови не сразу после заражения, а лишь спустя несколько недель. Примерно в конце второй недели после заражения в крови появляются антитела класса IgM. Антитела этого класса указывают на недавнее заражение сифилисом, однако в отсутствие лечения они сохраняются в крови в течение нескольких месяцев и даже лет (при этом их количество постепенно снижается). Через 4-5 недель после заражения сифилисом в крови начинают определяться антитела другого класса – IgG. Антитела этого типа сохраняются в крови в течение многих лет (иногда в течение всей жизни). Трепонемные тесты позволяют выявить наличие в крови антител (IgM и IgG), направленных на борьбу с бледной трепонемой.

Реакция иммунофлюоресценции (РИФ) или Fluorescent Treponemal Antibody (FTA, и его разновидность FTA-ABS) - это трепонемный тест, который применяется для подтверждения диагноза сифилиса на самых ранних стадиях (даже до появления первых симптомов).

Через какое время после заражения анализ становится положительным: как правило, через 6-9 недель.

Как оценивать результаты анализа: Результаты анализа выдаются в виде минуса или плюсов (от одного до четырех). Если в анализе стоит минус, значит антитела не выявлены, и вы здоровы. Наличие одного плюса и более говорит о наличии сифилиса.

Какие могут быть причины ложноположительных результатов: ложноположительные результаты встречаются редко, однако ошибки возможны у людей с заболеваниями соединительной ткани (системная красная волчанка, дерматомиозит и пр.), у беременных и пр.

Реакция пассивной агглютинации (РПГА), или Treponema pallidum hemagglutionation assay (TPHA) – это специфический тест, который применяется для подтверждения диагноза сифилиса практически на любой его стадии.

Что обследуют: кровь из вены или из пальца.

Через какое время после заражения анализ становится положительным: как правило, уже через 4 недели.

Как оценивать результаты анализа: положительный результат РПГА указывает на то, что вы больны сифилисом, либо здоровы, но перенесли эту болезнь в прошлом.

Как оценивать полученный титр антител: в зависимости от титра антител можно ориентировочно предположить давность заражения сифилисом. Вскоре после первого попадания трепонемы в организм титр антител, как правило, менее 1:320. Чем выше титр антител, тем больше времени прошло от момента заражения.

Иммуноферментный анализ (ИФА), или Enzyme ImmunoAssay (EIA), или ELISA (Еnzyme Linked ImmunoSorbent Assay) – это трепонемный тест, который применяется для подтверждения диагноза и определения стадии сифилиса.

Что обследуют: кровь из вены или из пальца.

Через какое время после заражения анализ становится положительным: уже через 3 недели после инфицирования.

Как оценивать результаты анализа: положительный результат ИФА указывает на то, что вы больны сифилисом, либо перенесли это заболевание ранее. Этот анализ может оставаться положительным и после излечения.

Определение давности заражения сифилисом с помощью ИФА: в зависимости от того, какие классы антител (IgA, IgM, IgG) обнаружены в крови, можно предположить давность заражения.

Диагностика сифилиса:

Диагностика сифилиса намного сложнее диагностики других половых инфекций. Это объясняется тем, что возбудитель болезни не задерживается в половых путях, а проникает в организм и успешно прячется в теле человека, до определенного времени не выдавая себя симптомами и внешними проявлениями. И «поймать за хвост» эту инфекцию удается редко. Поэтому медики пользуются косвенными методами - серологическими реакциями, которые показывают не наличие самого возбудителя, а иммунный ответ организма.

Структурное изображение антител

Иммунный ответ - это сложный биохимический процесс, основу которого составляют антитела (белки-защитники) - IgM и lgG. Вначале появляются IgM, где-то спустя 7–10 дней после появления твердого шанкра, и сохраняются они в течение всего раннего сифилиса (то есть первые 2–4 года болезни). В позднем сифилисе IgM постепенно исчезают. Если болезнь обнаружена в раннем периоде, и проведено полноценное лечение, то IgM также исчезают. IgG вырабатываются в организме позже, примерно через 3–4 недели после появления твердого шанкра. Эти антитела сохраняются на всем протяжении болезни и остаются в течение нескольких лет даже после лечения.

Этим объясняется зависимость результатов разных анализов от периода болезни. Нетрепонемные тесты (РМП или RPR) реагируют на IgM. Поэтому они становятся положительными раньше трепонемных, и отрицательными - после проведенного лечения (или в третичном периоде). Трепонемные тесты (например, РПГА) реагируют на IgG, и, соответственно, выдают положительную реакцию позже и остаются положительными после лечения.

Кроме того, IgM, в отличие от IgG, являются очень крупными белками и менее специфичными, тесты на них часто ошибаются - IgM можно легко спутать с другими белками в крови. Поэтому нетрепонемные тесты часто выдают ложноположительные результаты.

Серологические реакции - анализы, которые показывают иммунный ответ организма. На разных периодах сифилиса активизируются разные типы антител. По этим типам врачи определяют стадию сифилиса.

Как результаты анализов связаны с клиническими проявлениями

Результаты анализов и клинические проявления напрямую зависят от иммунного ответа организма.

Ранний сифилис

• Первичный период характеризуется возникновением твердого шанкра - сифилитической язвы. В это время организм только начинает реагировать на инфекцию. Сразу после появления твердого шанкра иммунного ответа еще нет, и анализы крови будут отрицательными (серонегативная фаза первичного периода). Затем постепенно появляются антитела, иммунитет нарастает, и уже скоро серологические реакции дают положительный результат (серопозитивная фаза первичного периода).

Нетрепонемные тесты покажут болезнь через семь–десять дней после возникновения твердого шанкра, трепонемные - через 3–4 недели.

До того, как анализы крови станут положительными, диагноз можно подтвердить с помощью прямых методов диагностики - темнопольной микроскопии или ПЦР. Материалом для этих исследований служит соскоб с твердого шанкра. Эти анализы покажут, есть ли в язве бледные трепонемы или нет. Подробнее о том, как ведет себя иммунитет человека при сифилисе, читайте в отдельной статье.

Наиболее напряженный иммунитет к сифилису вырабатывается во вторичном периоде, когда тело человека полностью покрывается сыпью. В этот период становятся положительными все анализы - и трепонемные, и нетрепонемные. Еще в это время возможно исследование высыпаний с помощью прямых методов диагностики: бледную трепонему можно обнаружить во рту или в мокнущих элементах сыпи.

Поздний сифилис

• В третичном периоде иммунная система перестраивается, реакция организма приобретает аллергический характер: на коже появляются бугорки и гуммы. Снижаются и исчезают lgM, соответственно становятся отрицательными нетрепонемные тесты. Кроме того, в этот период поражается нервная система, и потому становятся положительными анализы при исследовании спинномозговой жидкости.

Пролеченный сифилис

• После полноценного лечения все кожные проявления исчезают, а нетрепонемные тесты становятся отрицательными. Трепонемные тесты могут оставаться положительными в течение нескольких лет и даже в течение всей жизни. О том, что ждет проболевших сифилисом, читайте в статье «Жизнь после лечения сифилиса».

Скрытый сифилис

• Скрытой болезнь может быть как в раннем периоде, так в позднем. В раннем периоде, как правило, становятся положительными трепонемные и нетрепонемные тесты. Исследование спинномозговой жидкости дает отрицательный результат, так как нервная система еще не поражена. В позднем периоде постепенно остаются положительными только трепонемные тесты. Результаты исследования спинномозговой жидкости становятся положительными.

Поздний скрытый и пролеченный сифилис между собой очень похожи: отсутствуют клинические симптомы и остаются положительными серологические реакции. Чтобы различить эти два диагноза, проводят анализ на определение IgM: если антитела «М» есть, то сифилис считается скрытым, если нет - то пролеченным.

Подтверждаем или исключаем сифилис: анамнез, симптомы, анализы

Подтвердить или исключить диагноз может только дерматовенеролог. Уролог или гинеколог могут лишь заподозрить болезнь по внешним признакам. И тогда они должны направить пациента к дерматовенерологу для дальнейшего обследования, лечения и наблюдения.

Диагноз «сифилис» основывается на совокупности следующих признаков:

На наличии или отсутствии внешних проявлений и симптомов.

На результатах минимум двух лабораторных исследований: нетрепонемного (РМП, или RW, или RPR) и трепонемного (РПГА или ИФА) тестов.

На данных о том, был ли сифилис ранее, и проводили ли уже его лечение.

Если симптомы присутствуют

Отрицательный RPR при положительном ИФА/РПГА встречается обычно в позднем периоде. Тогда на наличие инфекции обязательно исследуют спинномозговую жидкость (РИФ-ц, РИТ).

Обратная ситуация, когда RPR положительный, а РПГА отрицательный (или сомнительный) встречаются крайне редко. Это возможно в первые 3–4 недели после появления твердого шанкра, а также во вторичном периоде во время иммунной «прозоны» (чрезмерно большого количества антител). В этом случае анализ рекомендуется повторить.

Если внешних признаков нет

Тогда диагностика усложняется. Здесь врачи опираются только на анализы и сведения о проводимом или непроводимом ранее лечении.

Варианты в этом случае:

• Если нетрепонемный (один из РМП/RW/RPR) и трепонемный тест (РПГА/ИФА) - положительны, проводится дополнительный альтернативный трепонемный тест (ИФА, если первый тест был РПГА, и наоборот - РПГА, если был ИФА). Если тест становится отрицательным, то кровь пациента направляют в экспертную лабораторию и проводят дополнительные анализы. В случае если второй трепонемный тест становится положительным, ставят диагноз: «скрытый сифилис». Такое состояние может наблюдаться некоторое время после проведенного лечения. Если пациенту было проведено до этого лечение, то для того чтобы подтвердить диагноз, проводят дополнительное исследование на IgM. При положительных результатах - диагноз подтверждается, но исследование все равно рекомендуется повторить через 2 недели. При отрицательных результатах сифилис опровергается.
• Если нетрепонемный тест (РМП/RW/RPR) отрицательный, а трепонемный (РПГА/ИФА) положительный, то состояние может оцениваться как «поздний сифилис» или «отсутствие сифилиса», если пациенту было проведено ранее полноценное лечение. Для разграничения этих двух состояний проводят дополнительный тест на IgM (ИФАIgM, РИФ-абс-IgM, Иммуноблоттинг-IgM). Если IgM в крови имеются, ставят «поздний сифилис» и лечат. Если нет - пациент считается здоровым.
• Если RPR (или RW/РМП) положительный, РПГА положительный, а ИФА отрицательный (или наоборот: РПГА «-» и ИФА «+»), то результаты анализов вызывают сомнение и рекомендуется отправить кровь в экспертную лабораторию или провести альтернативные анализы (РИФ, Иммуноблоттинг).
• Если нетрепонемный тест (PMП/RW/RPR) положительный, а трепонемный (РПГА/ИФА) отрицательный, то проводится дополнительный трепонемный тест (ИФА/РПГА). Если он дает положительный результат, то кровь направляют в экспертную лабораторию. Если отрицательный, то диагноз опровергается, а результат нетрепонемного теста признается ложноположительным.

Для более простого понимания материала приведем таблицу расшифровки результатов клинико-лабораторного исследования пациента:

ифа на сифилис положительныйПопулярные статьи на тему: ифа на сифилис положительный

Дерматокосметология как направление медицинской деятельности существует с незапамятных времен, поскольку ее предмет отражает постоянное и естественное стремление человека к красоте и здоровью тела.

В последнее время наблюдается повышение частоты воспалительных заболеваний гениталий герпетической этиологии с преобладанием латентного, хронического рецидивирующего течения с развитием различных нарушений репродуктивного и соматического здоровья.

Побочное действие лекарственных средств (ПДЛС) продолжает оставаться одной из актуальнейших проблем клинической медицины, в том числе дерматологии, занимая четвертое место после болезней сердца, онкологических заболеваний и инсульта среди причин смерти.

Выкидыш и замершая беременность для любой женщины, мечтавшей о ребенке, - большое горе. Как не допустить повторения такой ситуации в будущем? Узнайте больше о современных способах выявления и лечения нарушений, предрасполагающих к выкидышу.

Вопросы и ответы по: ифа на сифилис положительный

У пациентов, прошедших курс лечения, может сохраняться положительный результат, так называемый «серологический шрам».

Т.о. врач должен оценить состояние комплексно на очном приеме. Если сифилис был давно, симптомов нет, других клинических проявлений нет, первая беременность благополучна, то повода для таких мероприятий нет!

У меня следующий вопрос (очень для меня важный!):

На данный момент беременность 32 недели. В 14 недель сдавала в ЖК обязательные анализы и оказалась реакция на сифилис положительной. Ни я ни муж никогда не болели сифилисом, вместе 10 лет, у меня других партнеров не было, у мужа до меня был 1 контакт с презервативом. Сразу было сделано полное обследование в КВД и меня и мужа. Результат: у мужа все отрицательно, у меня - КСР - отрицат.; РПГА - отриц.; РИП - отриц.; РИФ абс. - отриц; ИФА lgM - отриц.; ИФА lgG - положит. т 1/80. Было рекомендовано повторить анализы в 20 недель. Результаты в 20 недель: КСР - отрицат.; РПГА - отриц.; РИП - отриц.; РИФ абс. - отриц; ИФА lgM - отриц.; ИФА lgG - слабоположит. т 1/40. Получила заключение: «Данных за сифилис нет. Сероколебания носят неспецифический характер». И вот в 32 недели опять обязательные анализы в ЖК, результат - ИФА (АТ кTreponema pallidum сум. - положит. т 1/80), ИФА (Микрореакция) - отрицат. В ЖК опять начали гонять к дерматовенерологам, в КВД, опять нервы и т.д. Неужели снова нужно делать полное обследование? На сколько я знаю за 2-3 недели до родов необходимо делать последний, 3-й, обязательный анализ на сифилис. И там скорее всего тоже будет положит. реакция. Очень переживаю! Заранее благодарна за ответ!

P.S. Прошу прощения если аббревиатура некоторых реакций неправильно написана (уж очень неразборчиво в заключении врач написал) 🙂

Здравствуйте. Я вам уже задавала вопрос на сайте «Здоровье Украины» очень кратко. Я полно напишу свою историю. Пожалуйста, проконсультируйте. Какие анализы нужно ещё сдать?

2 года назад был случайный половой контакт открытый.

Через 1,5 месяца начался какой то ужас: длительная лихорадка, в области щитовидки как будто шла какая то работа, что то гудело, потом головные боли, ангины, сильные боли в костях и мышцах сначала колющего характера, потом как кипяток шёл по мышцам,тошнота,Сыпь разовая,частые ОРВИ,которые длительное время не поддавались лечению,отдышка,трудности при дыхании,неприятный запах изи рта, невралгии, ночное потоотделение,сильная слабость, снижение работоспособности. Я превратилась почти в труп. До этого я была здоровой и цветущей девушкой, профессионально занималась танцами.Физически была достаточно вынослива и активна. Простудами вообще практически не болела.Была практически здорова.

Через 1год и 10 месяцев после незащищённого полового контакта сдала тест на вич в 2 разных лабораториях ИФА на антитела к вич отрицательно.

Гепатит В и С отрицательно.

ВЭБ ПЦР отрицательно

ЦМВ ПЦР отрицательно

Вирус герпеса 6 типа отрицательно

Токсоплазмоз ПЦР отрицателно

иммуноглобулин А 3,78 г/л (норма 0.70-4.00)

иммуноглобулин М 4,04 г/л (норма 0.40-2.30)

иммуноглобулин G 12,74г/л (норма 7.00-16.00)

Иммуноглобулин Е 8,49 г/л (норма до 100)

компонент комплемента С3 1,54 г/л (норма 0.9-1.8)

компонент комплемента С4 0,43 г/л (норма 0,1-0,4)

Спонтанная 112 оптич.единицы 80.0-125.0

Индуцированная 212 оптич.единицы 150.0-380.0

Фагоцитарный индекс 1,9 (1.5-3.0)

митогеном Кон.А 1,36 оптич.единицы (1.2-1.68)

ЦИК крупные 18 оптич.единицы (до 20)

ЦИК средние 99 оптич.единицы (60.0-90.0)

ЦИК мелкие 182 оптич.единицы (130.0-160.0)

Т-лимфоциты (СД3+,СД19-) 84,7 %проценты (норма 54-83)

Т-хелперы/Т-индукторы (СД4+,СД8-) 66.1% (норма 26-58)

(СД4+,СД8-/СД4-,СД8+) 3.8 % (норма 1.2-2.3)

(СД3+,СД56+) 5 % (норма 3-8)

NK клетки (СД3-, СД56+) 5,3 % (норма 5-15)

В-лимфоциты (СД3-,СД19+) 9,5% (норма 5-14)

Моноциты (СД14) 1,4% (норма6-13)

Общий лейкоцитарный антиген,СД45 99,8 % (норма

Биохимия положительное СРБ, остальное норма.

Цитирую: «Может, нужно сдать ещё какие то анализы и прийти к вам на приём?» Целесообразно изменить порядок действий: сначала прийти на прием, а потом, выслушав и осмотрев Вас, ознакомившись со всеми имеющимися результатами исследований, разработать программу обследования.

С уважением, Ю.Сухов.

Мне 31 год,я на 35 неделе беремености. 2 месяца назад сдала кровь на инфекции методом ИФА(потому как попала с отрвлением в инфекционное отделение, там и сделали исследование),мой гинеколог не направляла меня сдавать кровь на инфекции на ранних строках беременности (что мне кажется странным, хотя на СПИД и сифилис кровь брали трижды за беременность, все торицательно). Сейчас мне сообщили результаты. Прошу, прокомментируйте, пожалуйста. Некоторые показатели вызывают тревогу, такие как на вирус крснухи, ЦМВ, герпес HSV 1/2, Эпштейн-Барр вирусная инфекция (EBV):

Герпес HSV Ig G 1 типа К=3,4, 2 типа отр.

Эпштейн-Барр VCA K=4,7 NA -

хламидии и микоплазма - отр.

Коэффициент позитивости К=оптическая плотность образца. Если К меньше 0,9 - результат отрицательный, если К от 0,9 до 1,1 - сомнительный, если К больше 1,1 - положительный.

Ig G, EBV, NA значение до 55 у.е./мл может быть в норме, выше этого значения - результат положительный.

Пожалуйста, прокомментируйте! Благодарю за внимание!

Выявление антител IgG к ВПГ1 и ЦМВ лишь свидетельство того что Вы, как и большинство взрослых, пожизненный носитель ВПГ1 и ЦМВ. Само по себе носительство этих вирусов не опасно, вреда не причиняет, лечения не требует. Лечение может потребоваться лишь в случае их активации. С микоплазмами и хламидиями Вы ранее не встречались.

С вирусом краснухи Вы уже знакомы. Если Вы не знаете болели ли Вы когда то краснухой или были вакцинированы, то чтобы убедиться что иммунитет к ней полностью сформирован, лучше проверить авидность IgG к краснухе (должна быть высокой). Тогда у Вас сформирован стойкий пожизненный иммунитет к вирусу краснухи. С иммунитетом Вы сама больше не сможете болеть краснухой, а все Ваши будущие детки будут защищены от них всю беременность и 6-12 месяцев после родов (пока в их крови будут циркулировать Ваши антитела IgG к вирусу краснухи)

С ВЄБ нужно разбираться на очном прийме, т.к. неясно идет речь о антителах IgG к VCA или IgМ.

Какие анализы крови сдают на сифилис: RW, РПГА, ИФА, VDRL, RPR, РИБТ, расшифровка результатов тестов

Сифилис – заболевание инфекционной природы, обусловленное спирохетой Treponema pallidum, склонное к прогредиентному хроническому течению, с чёткой периодизацией клинической симптоматики.

Преобладание полового пути передачи над контактным и трансплацентарным ставит это заболевание в ряд венерических (ЗППП, ИППП). Помимо указанных способов передачи инфекции особую роль играет артифициальный путь (от лат. «artificio» - искусственно созданный).

Он характерен для медицинских учреждений, в основном, реализуется в условиях стационара. Инфицирование происходит при гемотрансфузиях, различных хирургических операциях, инвазивных диагностических методах.

Несмотря на карантинизацию донорской крови, проблема выявления сифилиса у доноров на разных стадиях заболевания все ещё актуальна.

Поэтому диагностические мероприятия при сифилисе требуют стандартизации, внедрения новых чувствительных и информативных методов идентификации, а также сведения к минимуму ошибок и неправильной трактовки результатов анализов.

Классификация методов лабораторной диагностики

Диагностика сифилиса имеет некоторые особенности и отличается от диагностики других бактериальных инфекций. Сложное строение и антигенные свойства бледной трепонемы обусловливают ошибки в интерпретации результатов серологических реакций.

Сдать анализ крови на сифилис предлагают 3 основным группам пациентов:

1 Скрининг и диспансеризация групп населения (в том числе и беременность, постановка на учет в женской консультации, поступление на работу и оформление медкнижки и так далее).

2 Скрининг в группах риска (незащищенные половые контакты с человеком, инфицированным сифилисом, лица после принудительных сексуальных контактов, ВИЧ-инфицированные и так далее).

3 Лица, имеющие симптомы заболевания, или лица с подозрением на сифилитическую инфекцию.

Все лабораторные методы условно подразделяют на прямые и непрямые.

Прямые методы

1 Идентификация Treponema pallidum в тёмном поле (темнопольная микроскопия).

2 Заражение подопытных животных (культивирование в лабораторных животных).

3 ПЦР (полимеразно-цепная реакция).

4 ДНК-зонд или гибридизация нуклеиновых кислот.

Непрямые методы

Серологические реакции - это методы лабораторной диагностики, базирующиеся на обнаружении антител (сокращенно АТ) к антигенам бледной трепонемы (сокращенно АГ). Они имеют основное значение для подтверждения диагноза.

1 Нетрепонемные тесты:

• Реакция Вассермана (РСК);
• Реакция микропреципитации (МР, РМП) и ее аналоги, которые приведены ниже;
• Тест быстрых плазменных реагинов (RPR, РПР);
• Тест с красным толуидином и сывороткой (TRUST);
• Нетрепонемный тест Лаборатории исследования венерических болезней - VDRL.

2 Трепонемные тесты:

• Р-ция иммобилизации Treponema pallidum – РИБТ/РИТ;
• Р-ция иммунофлюоресценции – РИФ, FTA (разведения сывороток РИФ-10, РИФ-200, РИФ-абс);
• Р-ция пассивной гемагглютинации (РПГА, ТРПГА, TPHA);
• Иммуноферментный анализ (ИФА, EIA);
• Иммуноблоттинг.

Рисунок 1 - Алгоритм серодиагностики сифилиса

Гистоморфологические методы

Эти методы сводятся к выявлению особенностей гистоморфологии сифилитических проявлений. Внимание уделяется тонкостям строения твёрдого шанкра. Однако, дифференциальная диагностика инфекции с помощью гистологии весьма затруднительна. Гистоморфология используется с другими лабораторными и клиническими тестами.

Микроскопия Treponema pallidum в тёмном поле

Этот метод основывается на непосредственном обнаружении бледной трепонемы в исследуемом материале с помощью микроскопа и специальных приспособлений (чаще всего отделяемое эрозий и язв, реже спинномозговая жидкость и другие субстраты).

С помощью скарификации, соскоба, сдавливания с эрозий и язвенных дефектов получают экссудат, затем исследуют в микроскоп подготовленный препарат.

Обычно бледные трепонемы выявляют в препарате, полученном из шанкра, из очагов вторичного свежего, вторичного рецидивного сифилиса, а также пунктата лимфоузлов, плаценты.

Основанный на феномене свечения мелких частиц в тёмном поле при попадании луча света (феномен Тиндаля), метод прекрасно позволяет дифференцировать возбудителя сифилиса от других трепонем на основании морфологических отличий и отличий в способах передвижения бактерии.

Для микроскопии используют специальный темнопольный конденсор соответствующего оптического разрешения. Препарат получают способом раздавленной капли (каплю материала наносят на чистое обезжиренное предметное стекло и закрывают очень тонким покровным).

На покровное стекло капают иммерсионное масло. С помощью поворота тубуса и поворота увеличивающей линзы регулируют нужное освещение.

В тёмном поле микроскопа обнаруживаются клетки крови, эпителиальные клетки и сам возбудитель сифилиса. Бледная трепонема выглядит как спираль, очень тонкая, излучающая серебристый цвет, с плавными движениями.

Рисунок 2 - Темнопольная микроскопия как способ визуализации бледной трепонемы в исследуемом материале. Источник иллюстрации - CDC

Treponema pallidum необходимо отличать от других трепонем, в том числе и Tr. refringens, которая может содержаться в ротоглотке и на слизистой половых органов. Эта бактерия совершает хаотичные движения, имеет широкие и несимметричные, довольно грубые завитки. Кроме того, Treponema pallidum отличают от Tr. Microdentium, Tr. Buccalis и Tr. vincenti.

Визуализация бактерий в тёмном поле иногда дополняется реакцией флюоресценции. Для этого меченые флюоресцирующим красителем противотрепонемные АТ добавляют в нативный материал. При этом образуется комплекс, называемый антиген-антитело (сокращенно АГ-АТ), который и является объектом для исследования с помощью люминесцентного микроскопа.

Метод полимеразной цепной реакции (ПЦР)

ПЦР, разработанная в 1991 году для обнаружения молекулы дезоксирибонуклеиновой кислоты (ДНК) бледной трепонемы, является высокочувствительным и специфичным, позволяет выявить фрагменты ДНК возбудителя.

Базируется данный анализ на копировании коротких участков ДНК бледной спирохеты, который удовлетворяет заданным параметрам и присутствует в образце. Всё это выполняется в искусственных условиях (in vitro). Реакция проводится в приборе - амплификаторе, который обеспечивает периодизацию температурных циклов. Происходит охлаждение с последующим нагреванием пробирок с погрешностью в 0,1˚С.

ДНК-матрицу прогревают в течение 2 минут при температуре 92-98˚С (максимальная температура используется, если полимераза термостабильна). При нагревании цепи ДНК расходятся из-за распада водородных связей между ними. В стадии отжига температуру реакции снижают для связывания праймера с одноцепочечной матрицей.

Отжиг занимает около 30 секунд, в течение этого времени синтезируются сотни нуклеотидов. Вновь синтезируемые молекулы копируются полимеразой, в результате многократно увеличиваются специфические фрагменты дезоксирибонуклеиновой кислоты. Последующая детекция фрагментов проводится с помощью электрофореза в геле агар.

ПЦР-диагностика сифилиса пока носит экспериментальный характер, но оправдана при выявлении врождённой инфекции, в сложных диагностических случаях или при минимальном содержании бледных трепонем в исследуемом материале.

ДНК-гибридизация

ДНК-гибридизация выполняется in vitro и основана на полном или частичном соединении двух одноцепочечных молекул ДНК в одну молекулу. В случае полного соответствия комплементарных фрагментов объединение происходит легко. Если комплементарное соответствие частичное, то объединение цепочек ДНК происходит медленно. На основании времени слияния цепей можно оценить степень комплементарности.

При нагреве ДНК в буферном растворе разрываются водородные связи азотистыми основаниями, являющимися комплементарными, в результате цепочки ДНК расходятся. Далее получают препарат из двух денатурированных дезоксирибонуклеиновых кислот. При охлаждении одноцепочечные участки ренатурируют. Образуется так называемый гибрид ДНК.

Метод позволяет оценить и анализировать скорость отжига, учитывая особенности (сходства и различия) ДНК между видами или внутри вида.

Применение ДНК-зонда заключается в гибридизации меченого фрагмента ДНК со специфичным участком ДНК для идентификации комплементарных последовательностей нуклеотидов. Для метки зонда используется группа ненасыщенных атомов (хромофоры) или радиоактивные изотопы.

ДНК–зонд применяют для гетерогенного и гомогенного детектирования нуклеиновых кислот. Роль зонда заключается в определении участков, на которых произошло слияние мишень-зонд. Детектирование в гомогенной системе имеет преимущество - позволяет отследить гибридизацию молекул ДНК в реальном времени.

Суть метода сводится в денатурации ДНК и ренатурации (воссоединения цепочек ДНК). Процесс ренатурации нуклеиновой кислоты и ДНК-зонда заканчивается образованием «гибрида».

Специфические последовательности нуклеиновых кислот гибридизуются с ДНК–зондом и, таким образом, выявляются и позволяют оценить количество ДНК в исследуемом материале.

Заражение лабораторных животных

Высокая чувствительность кроликов к Treponema pallidum (порядка 99,9%) позволяет применять их в диагностике сифилитической инфекции.

Заражение кроликов проводится в научно-исследовательских центрах и является «золотым стандартом» оценки чувствительности других методов.

Вернёмся к трепонемным и нетрепонемным тестам, так как они используются чаще всего. Рассмотрим их преимущества и недостатки, а также ошибки в интерпретации результатов.

Нетрепонемные тесты

Это тесты определения антител IgG и IgM к стандартизированному кардиолипиновому антигену. Их существенным недостатком является сравнительно небольшая специфичность.

Низкая стоимость и простота выполнения позволяют отнести эти тесты к отборочным диагностическим, необходимым для установки предварительного диагноза и скрининга среди населения.

Именно нетрепонемные тесты сдаются при оформлении медицинской книжки, устройстве на работу, постановке на учет в женской консультации.

1 Минимальная чувствительность в стадии сифилиса первичного – 70%;

2 Минимальная чувствительность в стадии сифилиса позднего – 30%;

3 Возможность появления ложноотрицательных и ложноположительных результатов;

4 Трудоёмкость выполнения РСК.

1 Относительно маленькая стоимость производства тестов;

2 Получение быстрого ответа;

3 Возможность их применения для скрининга.

Получение ложноположительных или слабоположительных проб возможно в следующих случаях:

1 Нарушение технологии выполнения, при блокировании комплекса АГ-АТ.

2 Наличие у больного аутоиммунных заболеваний (ревматоидный артирит, ревматизм, склеродермия, системная красная волчанка, саркоидоз и др.).

3 Злокачественные новообразования.

4 Вирусные и бактериальные инфекции.

5 Эндокринные заболевания (аутоиммунный тиреоидит, сахарный диабет).

6 Беременность.

7 Употребление алкоголя.

8 Приём жирной пищи.

9 Старческий возраст.

Как видно из списка, существует достаточно причин для неверного результата. Поэтому к нему следует весьма настороженно относиться. Рассмотрим наряду с РСК ещё две пробы. Это реакция микропреципитации и VDLR (ее модификация).

Реакция связывания комплемента (РСК, Вассермана, RW)

Это проба, основанная на способности комплемента связываться с комплексами АГ-АТ. Идентифицируют образовавшийся комплекс с помощью гемолитической системы. Кардиолипиновый антиген заметно повышает чувствительность пробы.

Чувствительной является и реакция Колмера, которая заключается в выполнении при различных температурных режимах. Так, первая фаза реакции Колмера протекает при температуре 20˚С в течение получаса, вторая фаза при тепературе 4-8˚С на протяжении 20-ти часов. За это время происходит связывание комплемента.

При выполнении РСК возможно получение резко положительных результатов. Причиной, вероятно, является большой титр антител в неразведенной сыворотке. В этом случае пробы ставят с уменьшающими дозами.

Для дифференцировки стадий сифилиса и оценки эффективности противосифилитического лечения определяют количество АТ в сыворотке.

Позитивность пробы оценивают с помощью крестов, также в реакциях Вассермана, Колмера и Канна указывается разведение сыворотки.

Реакция микропреципитации

Так как трудоёмкость выполнения вышеуказанных проб велика, то для широты обхвата диспансеризацией разных групп населения разработан ускоренный способ серодиагностики сифилиса, так называемый экспресс-метод – реакция микропреципитации (сокращенно МР, РМП).

Она выполняется с кардиолипиновым антигеном и вспомогательными веществами. Его преимуществом является забор периферической крови для исследования. Это значительно ускоряет и саму методику, и работу лаборантов.

Рисунок 2 - Реакция микропреципитации (схема)

Для проведения МР необходимы плазма или инактивированная сыворотка крови пациента (именно они содержат антитела). Далее плазму помещают в маркированные лунки. Затем, к исследуемому материалу добавляют каплю кардиолипинового антигена, смешивают и встряхивают. В итоге в сыворотке инфицированного появляются характерные хлопья, разные по степени интенсивности.

Это качественная проба. При количественной оценке используются 10 разведений сыворотки, помещаемой в 10 лунок с соответствующей маркировкой. При качественной МР ответ указывается в виде крестов (плюсов) или минуса, при количественной указывается титр антител (1:2, 1:4 и так далее).

Наличие хлопьев расценивается как положительный или слабоположительный ответ. Возможно появление флокулята и при отсутствии заболевания, поэтому окончательную оценку полученного результата проводят после контрольного исследования или проведения других реакций (РИБТ, РИФ, ИФА, РПГА).

Рекомендованный Всемирной организацией здравоохранения метод постановки реакции с антигеном липоидной природы (АГ) по праву считается лучшим среди других стандартных нетрепонемных тестов. Разработан в США, штате Джорджиа в лаборатории венерических болезней (Veneral Diseases Research Laboratories).

Аббревиатура учреждения послужила названием для пробы – VDRL. VDRL - это модификация МР. Сыворотку от больного сифилисом инактивируют и помещают на предметное стекло. Используемый антиген состоит из кардиолипина, холестерина и лецитина в разном процентном соотношении. Ответ регистрируется практически сразу.

Отчётливая флокуляция возникает в присутствии в сыворотке антител. Сыворотка становится реактивна по прошествии 4-х недель после заражения. Для оценки количества антител, сыворотку предварительно разводят в геометрической прогрессии.

1 сравнительно высокая чувствительность;

2 сравнительно высокая специфичность;

3 легкость выполнения;

4 малая стоимость реактивов;

5 получение быстрого ответа.

Недостатком VDRL является относительно высокая частота ложноположительных результатов.

Их причинами являются всё те же перечисленные выше заболевания.

Трепонемные тесты исполняются со специфическими АГ Treponema pallidum. Они необходимы и обязательны для установления окончательного диагноза. Это реакция иммунофлюоресценции (РИФ), реакции непрямой гемагглютинации (РПГА), иммуноферментный анализ (ИФА) и др.

После положительного результата нетрепонемного теста (RPR, MP, VDRL) всегда должны выполняться трепонемные (чаще комбинация - РПГА, ИФА, РИФ).

Трепонемные тесты более сложны в исполнении, чем экспресс-тесты, и требуют больших затрат денежных средств.

Данная реакция (сокращенно РИФ) используется для диагностики сифилиса, в том числе и скрытых форм, и перепроверки положительных и ложноположительных проб.

РИФ основана на свечении меченых антител при соединении с комплексом антиген-антитело под кварцевой лампой. Метод начал применяться в 60-х годах и отличался простотой выполнения и высокой специфичностью (которая немного уступает РИБТ).

Он имеет несколько модификаций: РИФ-10, РИФ-200 и РИФ-abs.

Наиболее чувствительна РИФ в разведении 10 раз, а остальные - более специфичны. РИФ проводится в двух фазах. К АГ добавляют сыворотку крови пациента. Образуется комплекс АГ-АТ, который исследуется в следующей фазе. Далее меченный с помощью флюоохрома комплекс идентифицируют при микроскопии. Если не наблюдается свечение, это указывает на отсутствие специфических АТ в сыворотке крови.

РИФ-200 является наиболее ценным из всех разведений. Метод предназначен для диагностики различных форм сифилиса, особенно скрытого сифилиса и перепроверки положительных проб.

Реакция иммобилизации бледных трепонем (сокращено РИБТ, РИТ) одна из сложных серологических проб, требующих значительных усилий и финансовых затрат. РИБТ применяют все реже, но актуальность ее сохраняется в диагностике скрытого сифилиса.

Большое значение она несёт в распознавании ложноположительных результатов у беременных женщин и основывается на иммобилизации бактерий в присутствии иммобилизинов – поздних антител.

Результат оценивается на процентном количестве (%) иммобилизированных трепонем с помощью специальной таблицы:

1 От 0 до 20 - отрицательная проба.

2 От 21 до 50 - слабоположительная проба.

3 От 50 доположительная реакция.

Ложноположительные результаты также возможны при применении РИБТ. Так, неверный ответ возможен при инфицировании тропическими трепанематозами, а также, при туберкулёзе, циррозе печени, саркоидозе и пациентов старческого возраста.

Этот анализ крови на сифилис называется реакцией пассивной гемагглютинации (сокращенно, кровь на РПГА, ТРПГА).

Антиген для РПГА приготавливают из эритроцитов барана, покрытых фрагментами бледных трепонем (полученных от инфицированных кроликов (см. рисунок 4)). Для анализа используется венозная кровь (плазма или инактивированная сыворотка) пациента.

При добавлении антигена в сыворотку пациента с сифилисом происходит образование комплекса АГ-АТ, который приводит к агглютинации эритроцитов. агглютинация определяется субъективно врачом-лаборантом.

Рисунок 3 - Схема РПГА (реакция пассивной гемагглютинации)

Проба оценивается как положительная при появлении агглютинатов равномерной розовой окраски. Окрашивание преципитата в красный свидетельствует об осаждении эритроцитов. РПГА является высокочувствительной и высокоспецифичной.

Реакция микрогемагглютинации

Она является упрощённым вариантом РПГА. Отличается от пробы, описанной выше, меньшим количеством антигена, разбавителя и сыворотки крови для выполнения реакции. Через 4 часа после инкубации сыворотки можно оценить пробу. Используется при скрининговых и массовых обследованиях на сифилис.

Иммуноферментный анализ

Иммуноферментный анализ (сокращенно ИФА) базируется на специфической реакции антиген-антитело. Биологический материал (сыворотка крови пациента, ликвор) вносят в лунки, на твердой поверхности которых фиксированы антигены бледной трепонемы. Исследуемый материал инкубируют, затем отмывают антитела, не связавшиеся с антигенами (см. рисунок 5).

Идентификация полученного комплекса осуществляется на этапе ферментации с помощью иммунной сыворотки, меченной ферментом. При химической реакции фермент окрашивает полученные комплексы. Интенсивность окрашивания зависит от количества специфических антител в крови пациента и фиксируется спектрофотометром.

Рисунок 4 - Схема ИФА (иммуноферментного анализа)

Чувствительность ИФА составляет более 95% . Метод используется в автоматизированном режиме для исследования декретируемых групп населения: доноров, беременных и других, для уточнения диагноза при положительных и ложноположительных нетрепонемных тестах.

Иммуноблоттинг

Иммуноблоттинг – высокочувствительный метод, модификация простого ИФА. Реакция основана на электрофорезе с разделением антигенов бледных трепонем.

Разделенные иммунодетерминанты переносят на нитроцеллюлозную бумагу и проявляют в ИФА. Далее инкубируют сыворотку и смывают не связавшиеся антитела. Полученный материал обрабатывают иммуноглобулинами (IgМ или IgG), меченными ферментом.

Клиническая оценка результатов лабораторной диагностики сифилиса

В таблице 1 ниже мы привели возможные результаты анализов и их расшифровку. Как можно видеть в таблице, основное значение при расшифровке имеет комплексная оценка тестов.

Таблица 1 - Расшифровка результатов серологических реакций (анализов крови на сифилис). Для просмотра кликните по таблице

Оценка реактивности тестов выполняется также «крестами»:

1 Максимальный ответ (резко положительная проба) обозначается с помощью 4-х крестов.

2 Положительная проба обозначается с помощью 3-х крестов.

3 Слабоположительную реакцию обозначают двумя крестами.

4 Один крест свидетельствует о сомнительном и отрицательном результате.

5 Отрицательный ответ маркируют знаком «минус».

Проблема оптимизации лабораторной диагностики сифилиса не потеряла свою актуальность до настоящего времени. Современные методы диагностики, несмотря на стремление учёных привести диагностику к максимально высоким показателям чувствительности и специфичности, требуют контрольной проверки и индивидуального подхода.

Особенностью сифилитической инфекции является феномен серорезистентности, который так и не получил научного объяснения. Диагноз выставляется после полноценного обследования больного эпидемиологическими, клиническими, лабораторными методами.

На фоне экономико-технического развития медицины наблюдается и прогресс в разработке новых критериев диагностики сифилиса. Всё это позволит быстро, успешно и безошибочно лечить пациентов.